【摘 要】
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目的：探讨减毒沙门氏菌介导的人HNP-3乳腺定位表达产物对革兰氏阴性菌的抗菌效果.方法：将构建的乳腺定位表达载体pEGFP-WAP-HNP-3经电转化导入减毒沙门氏菌ΔcrpC78-1,构建重组
【机 构】
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河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室,河南洛阳471003
【出 处】
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河南省畜牧兽医学会第八届会员代表大会暨2013年学术研讨会
论文部分内容阅读
目的：探讨减毒沙门氏菌介导的人HNP-3乳腺定位表达产物对革兰氏阴性菌的抗菌效果.方法：将构建的乳腺定位表达载体pEGFP-WAP-HNP-3经电转化导入减毒沙门氏菌ΔcrpC78-1,构建重组菌ΔcrpC78-1(pEGFP-WAP-HNP-3),将重组菌分点注射到怀孕后20-22d母兔腹部乳腺分布区,收集兔分娩后不同时间的泌乳,Western.blot检测乳中HNP-3融合蛋白表达情况,ELISA检测乳中HNP-3融合蛋白的表达水平,活菌计数法检测泌乳中HNP-3融合蛋白抑菌效果.结果：乳汁中在40kDa处有HNP-3融合蛋白阳性杂交信号,母兔分娩后第5d HNP-3融合蛋白表达量最高,可达289ng·mL-1,及至第25d表达量仍可达到136ng·mL-1.血清和阴性对照乳中未检测到HNP-3.活菌计数法结果表明含HNP-3融合蛋白兔奶对大肠杆菌、沙门氏菌和绿脓杆菌有较好的抑菌效果,抑菌率分别为92.8％、42.0％和21.3％;结论：减毒沙门氏菌介导的人HNP-3融合蛋白乳腺定位表达产物对革兰氏阴性菌具有抑菌效果,为动物乳房炎的预防及新一代抗菌药物的研发提供了新思路.
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