猪前体脂肪细胞的分离培养及诱导分化

来源 :中国畜牧兽医学会家畜环境卫生学分会2016年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:za789321
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脂肪细胞的离体培养开始于20世纪60年代初,而且国内已经在小鼠、牛、羊等动物上获得了成功,但猪前体脂肪细胞培养还鲜有报道,对猪前体脂肪细胞进行长期离体培养研究脂肪代谢还需要解决细胞培养技术上的难题.我国地方品种猪的主要缺点是沉积脂肪能力强,瘦肉率低,严重影响其经济价值和肉用品质.因此,摸索建立猪前体脂肪细胞培养体系,研究其脂肪沉积与组织发育机理,具有重要的理论与实践意义.成功分离培养前体脂肪细胞涉及的因素较多,各个实验室选用的方法各不相同,在消化时间上,本研究采用37℃消化1h,王竹晨等用的是37℃消化15h;离心力上,白亮等采用的是2000 r/min 5min,本研究采用1200 r/min 10 min,获得的细胞较多,贴壁良好。细胞汇合后(d0)进行诱导分化,本试验d0在完全培养基中添加0.5 mM异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX),1μM地塞米松(DEX),1μg/ml胰岛素(INS)进行诱导培养,d6换为只含1μg/ml胰岛素(INS)的完全培养基,每72h或48h换液,发现细胞在第3天开始有脂滴,10天后形成大脂滴,分化率高。
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