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目的 脊髓性肌萎缩症(SMA)在儿童期由重到轻可分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型,其致病基因为运动神经元存活基因1(SMN1),SMN2基因为修饰基因仅表达少量全长SMN蛋白,与表型呈负相关.患儿SMN2拷贝数通常为2个以上,筛选提高全长SMN2表达的药物是目前SMA治疗研究的热点.本研究通过对体外培养的SMA患儿皮肤成纤维细胞进行阿米卡星及奥利索西的药物处理,定量检测药物处理前后细胞中全长SMN2转录本的水平,评价这些候选药物是否可以提高患儿的全长SMN转录水平,为今后SMA的药物治疗提供有力的可参考的实验数据.方法 通过知情同意,选取Ⅱ型SMA患儿7例,Ⅲ型患儿3例,患儿携带的SMN2拷贝数均为3.手术取患儿皮肤约0.5cm2,进行皮肤成纤维细胞体外培养.选取生长对数期的细胞进行6孔板接种,每孔1*105个细胞,当细胞融合至80％-90％时进行药物处理(阿米卡星：150ug/ml,75ug/ml；奥利索西：50ug/ml,10ug/ml,5ug/ml).24小时后提取皮肤成纤维细胞中的总RNA,逆转录,应用MGB探针进行绝对定量的real-timePCR分析,以GAPDH为参照基因,检测全长SMN2的转录本水平.重复两次实验,比较药物处理前后全长SMN2转录水平的改变.结果 阿米卡星药物不同浓度对患儿皮肤成纤维细胞中全长SMN2转录水平作用不同：75ug/ml浓度作用后,患儿均出现全长SMN2转录本水平的升高,平均为未处理组的1.57倍(范围：1.29-2.06；t=7.291,p=0.000),而药物浓度加大到150ug/ml时,并未出现转录水平的升高,平均为未处理组的0.984倍(范围：0.68-1.31；t=-0.292,p=0.777).奥利索西药物3种浓度均可提高患儿皮肤成纤维细胞全长SMN2转录水平,随着药物的浓度增加,全长SMN2转录水平增加越明显：5ug/ml组为未处理组的1.314倍(范围：1.00-1.78；t=3.996,p=0.003),10ug/ml组为未处理组的1.508倍(范围：0.79-2.56；t=3.082,p=0.013),50ug/m组为未处理组的3.29倍(范围：1.85-6.83；t=4.063,p=0.003),与未处理组相比均具有统计学差异.药物均使Ⅱ型和Ⅲ型患儿中全长SMN2转录水平增高,但在两型间升高的倍数没有统计学差异(P＞0.05).结论 阿米卡星和奥利索西均可提高患儿皮肤成纤维细胞中全长SMN2转录水平,进而可能使有功能的SMN蛋白表达量增加,有希望弥补SMA患儿由于SMN1基因缺失导致的SMN蛋白缺乏,为今后SMA药物治疗实验中候选药物的选择提供实验依据.