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目的 分析遗传性未结合型高胆红素血症患者UGT1A1基因的致病突变,从分子水平对患者进行明确诊断,并探讨UGT1A1基因突变与血清总胆红素的关系.方法 抽提61例遗传性未结合型高胆红素血症患者外周血基因组DNA,通过聚合酶链反应扩增UGT1A1基因的全部编码序列及启动子区,然后对扩增产物进行DNA测序,对出现重叠峰形的扩增产物进行TA克隆后再进行测序以确定重叠峰区域的DNA序列.同时测定患者血清胆红素.结果 在61例遗传性未结合型高胆红素血症患者中有46例UGT1A1基因存在致病突变.46例患者的UGT1A1基因突变有5种(图1),依据突变频率高低分别为211G→A(56.5％)、A(TA)6TAA→A(TA)7TAA(34.8％)、686C→A(4.3％)、1091C→T(2.9％)、1352C→T(1.5％).经检索发现1352C→T突变为新突变.剩余15例患者的UGT1A1基因未发现突变.依据血清总胆红素水平,44例遗传性未结合型高胆红素血症患者被诊断为Gilbert综合征,2例被诊断为Ⅱ型Crigler-Najjar综合征.在46例UGT1A1基因存在突变的遗传性未结合型高胆红素血症患者中,26例携带单一杂合突变[211G→A、A(TA)6TAA→A(TA)7TAA、686C→A、1091C→T、1352C→T],12例携带单一纯合突变[211G→A、A(TA)6TAA→A(TA)7TAA],5例携带双位点杂合突变[211G→A杂合+A(TA)7TAA杂合,211G→A杂合+1091C→T杂合],1例携带1位点杂合和1位点纯合突变[686C→A杂合+A(TA)7TAA纯合],1例携带3位点杂合突变[211G→A杂合+686C→A杂合+A(TA)7TAA杂合],1例携带2位点杂合和1位点纯合突变[211G→A杂合+686C→A杂合+A(TA)7TAA纯合].携带各类突变患者的血清胆红素水平见表2.其中携带单一位点纯合突变外加其它位点杂合突变患者[A(TA)7TAA纯合+211G→A杂合+686C→A杂合、A(TA)7TAA纯合+686C→A杂合]的血清胆红素水平(108.5μmol/L、87.4μmol/L)明显高于单位点纯合突变(32.6±11.9μmol/L)或多位点杂合突变患者(30.9±2.7μmol/L).而单位点纯合突变或多位点杂合突变患者的血清胆红素水平又略高于单一杂合突变患者(27.3±3.1μmol/L).因此UGT1A1基因突变导致的未结合型高胆红素血症患者的血清胆红素水平与UGT1A1基因突变相关.结论 大多数遗传性未结合型高胆红素血症是由UGT1A1基因突变所致,患者血清总胆红素水平不仅与基因突变位点数有关,而且与基因突变的杂合或纯合状态有关.