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本研究旨在确认缓殖子内穿孔素的存在,进而观察其在缓殖子形成和释放中的作用.利用RT-PCR从弓形虫RNA中扩增弓形虫PLP1基因片段,定向克隆入原核细胞表达载体pET-28a(+),转染大肠杆菌(E.coli),以组氨酸结合柱亲和层析法纯化表达产物.以重组蛋白分别免疫小鼠和白兔,获得鼠源和兔源高滴度抗体.小鼠经口感染Pru虫株,分别在感染后15天、30天、60天、90天和120天取小鼠脑组织,分别制作冰冻切片和石蜡切片.观察石蜡切片脑组织中包囊,并利用间接免疫荧光(IFA)和免疫组织化学技术(IHC)证实了PLP1在缓殖子中持续表达.分别用兔源抗体和鼠源抗体分别标记TgPLP1,利用IFA确认TgPLP1与TgMIC3共定位于缓殖子的微线体.应用realtimE-PCR检测体外培养Pru虫株过程中TgBAG1和TgPLP1表达水平,结果显示在Pru株从速殖子转换为缓殖子的过程中TgPLP1表达量显著下降.PLP1在弓形虫缓殖子发育过程中的作用还有待于进一步探讨.