【摘 要】
:
[目的]莫能菌素(monensin)抗球虫谱广,对各种艾美耳球虫均有较强的抑杀作用,是二十世纪后期使用的主导抗球虫药物.另外其还可用作牛和猪的促生长剂,提高饲料利用率与增重速度.由于毒性较大,对人畜具有潜在危害性,其在动物组织中的残留问题日渐受到重视.该研究旨在制备一种特异性强、灵敏度高的莫能菌素多克隆抗体,建立莫能菌素残留检测的免疫分析方法.[方法]该研究分别采用活化酯法和混合酸酐法合成莫能菌素
【机 构】
:
中国农业大学动物医学院 北京100193
【出 处】
:
2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会
论文部分内容阅读
[目的]莫能菌素(monensin)抗球虫谱广,对各种艾美耳球虫均有较强的抑杀作用,是二十世纪后期使用的主导抗球虫药物.另外其还可用作牛和猪的促生长剂,提高饲料利用率与增重速度.由于毒性较大,对人畜具有潜在危害性,其在动物组织中的残留问题日渐受到重视.该研究旨在制备一种特异性强、灵敏度高的莫能菌素多克隆抗体,建立莫能菌素残留检测的免疫分析方法.[方法]该研究分别采用活化酯法和混合酸酐法合成莫能菌素免疫原MON-BSA (AE)和包被原MON-OVA(MA).利用MON-BSA(AE)免疫新西兰大白兔,于四免一周后首次采集耳缘静脉血液检测.用方阵滴定法确定莫能菌素包被原最佳工作浓度.采用间接竞争酶联免疫吸附法(ELISA)建立检测莫能菌素的标准曲线.测定马杜霉素、盐霉素、甲基盐霉素、海南霉素、拉沙菌素的交叉反应率.[结果]莫能菌素包被原最佳工作浓度为1.2 μg/ml,多抗的最佳稀释倍数为1∶10000.该抗体的线性检测范围为1.30-129.09 ng/ml,IC50 15.3 ng/ml.该多抗对马杜霉素、盐霉素、甲基盐霉素、海南霉素、拉沙菌素的交叉反应率均小于0.5%.[结论]本研究成功合成莫能菌素人工抗原,并制备出相应的抗体,为下一步建立莫能菌素残留检测的免疫分析方法奠定了坚实的基础.
其他文献
[目的]探讨棉酚对BALB/C小鼠体外T淋巴细胞功能方面的影响,并进行作用机制的研究,为其作为免疫抑制剂的临床应用提供证据。[方法]本研究选用刀豆蛋白(ConA)作为T淋巴细胞的有丝分裂原,采用MTF法检测棉酚低、中,高剂量组对小鼠体外T淋巴细胞的毒性和增殖作用;流式细胞术检测棉酚对刀豆蛋白(Co nA)刺激下的小鼠体外T淋巴细胞表面分子CD4及CD8表达的影响;双抗夹心ELISA方法检测棉酚对T
[目的]研究三氯生单独及其和氟喹诺酮类加替沙星(GAT),莫西沙星(MXF),左氧氟沙星(LVX),司帕沙星(SPX),环丙沙星(CIP),恩诺沙星(ENR),诺氟沙星(NOR)联合抗五株不同支原体的活性.[方法]利用96孔板培养基稀释法,按照动物支原体最小抑菌浓度(MIC)测定的指导办法测定不同药物的体外抗支原体活性.在96孔微量滴定板上用棋盘式微量稀释法测定三氯生和氟喹诺酮类联合对不同菌株的活
[目的]研究甘草查耳酮A对金黄色葡萄球菌生物被膜表达谱的影响。[方法]甘草查耳酮A处理金黄色葡萄球菌生物被膜后,提取RNA,应用寡核苷酸芯片从全基因组水平考察甘草查耳酮A对金黄色葡萄球菌生物被膜表达谱的影响。[结果]用聚类软件T-profiler分析了基因芯片数据,与对照组相比,药物处理组824个基因差异表达(表达倍数≥2倍),其中355个基因上调,469个基因下调。[结论]甘草查耳酮A显著影响了
[目的]大肠杆菌诱导家蝇幼虫SSH文库筛选得到家蝇防御素基因,通过BLASTn软件分析显示,其与家蝇防御素mRNA全序列(AY260152.1)相似性为91%,与家蝇防御素前体mRNA序列(EF175879.1)相似性为93%,进一步对该基因进行cDNA和全长基因的克隆,并在大肠杆菌中表达,为研究该蛋白的生物学、免疫学活性奠定基础.[方法]:利用RACE技术获取家蝇防御素基因的全长序列,设计特异性
[目的]研究脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱发的肉鸡炎症对肝、肾和小肠道组织中多药耐药蛋白基因(Multi-drug Resistant,mdr)编码的P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达水平以及对P-gp底物恩诺沙星药动学的影响.[方法]采用荧光定量PCR方法,β-actin为内参,分别对LPS组、健康对照组鸡的肝、肾、十二指肠、空肠、回肠mdr的mR
[目录]重组抗体具有均一性高,可塑性强,还能够实现抗体的体外进化,是免疫检测技术领域未来重要的发展方向之一.本研究的目的是以分泌沙拉沙星特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞为起点,通过基因工程技术构建沙拉沙星单链抗体原核表达载体,并对表达的单链抗体进行纯化以及初步鉴定,为以后研究抗原抗体结合机制,奠定基础,从而更好的服务于兽药残留检测分析.[方法]以分泌沙拉沙星特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞为起点,提取RN
[目的]研究甘草查耳酮A对金黄色葡萄球菌生物被膜的抑制活性.[方法]通过刚果红,结晶紫,银染,激光共聚焦等实验鉴定S.aureus ATCC 29213和20株MRSA金葡菌的形成生物被膜能力;通过二倍稀释法考察了甘草查耳酮A对金葡菌的悬浮菌最小抑菌浓度(MICs)和最小杀菌浓度(MBCs),用琼脂平板法测定了它对生物被膜的最小抑菌浓度(MIBCs)和最小杀菌浓度(MBBCs);通过激光共聚焦考察
[目的]研究牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)对四氯化碳所致大鼠肝损伤的保护作用.[方法]40只大鼠随机分为5组,每组8只,正常组(10g/kg·b·w)和模型组(10g/kg·b·w)、联苯双酯滴丸组(0.2g/kg·b·w)、TCDCA高剂量组(0.2g/kg·b·w C组)和低剂量组(0.1g/kg·b·w D组).除正常对照组外,其他各组大鼠均灌胃50% CC14液体石蜡油1 mL/kg,一次性
[目的]评价亚甲基水杨酸杆菌肽预混剂对鸭的促生长效果,确定其饲料添加推荐剂量.[方法]试验将400只15日龄健康番鸭随机分成5组.其中受试药设三个剂量组,每1 kg饲料分别添加50、25和5 mg受试药(均以杆菌肽计)进行混饲给药;另分别设一杆菌肽锌预混剂对照组(25 mg/kg饲料,以杆菌肽计)和空白对照组.评价指标包括临床观察、存活率、平均日增重、饲料转化率和屠宰性能等.试验持续期为56天(1
[目的]从猪肺炎支原体诱导家蝇幼虫抑制性消减文库(SSH)中克隆到一个无同源差异基因(Musca dom-estica no homologous gene,Md-N),并在大肠杆菌中表达,以期从家蝇体内寻找具有抗猪肺炎支原体活性的抗菌蛋白.[方法]以猪肺炎支原体诱导家蝇幼虫的cDNA为模板,通过cDNA末端快速扩增技术(RACE)对Md-N进行扩增,根据拼接得到的全长序列设计特异性引物进行PCR