小鼠骨髓来源成熟状态树突状细胞的体外诱导培养及鉴定

• 作 者: 陈雪华 柯山 俞焙秦 郑重 顾琴龙 朱正纲 刘炳亚
• 机 构: 上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科；上海消化外科研究所200025
• 出 处: 中国医师协会外科医师分会成立大会暨第十二届全国普通外科学术会议
• 发表日期: 2007年11期
• 关键词: 突状细胞 白细胞介素 体外培养 细胞增殖 动物模型

目的：探讨短期内获得大量成熟状态小鼠树突状细胞(DC)的方法。
方法：取小鼠的骨髓细胞分别加入重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)100 ng/ml、重组小鼠白细胞介素4(rmlL-4)100 ng/ml于15％胎牛血清(FBS)的1MDM完全培养基中培养7 d，用光学显微镜、流式细胞仪、CCK-8淋巴细胞增殖检测试剂盒分别观察其形态、细胞表面免疫标志和刺激淋巴细胞增殖的能力。
结果平均每只小鼠可获得约3×107个骨髓细胞，培养7 d后可收获细胞约6 × 107。细胞具有明显的突起，表面高表达MHCⅡ类分子、CD80和CD86分子，尤以CD80高表达为主，DCs纯度达60％～70％，DC可明显刺激同种脾脏淋巴细胞增殖。
结论：应用小鼠骨髓来源的细胞，加入细胞因子rmGM-CSF和rmIL-4培养7天，能够在短期内获得大量成熟状态的树突状细胞。