【摘 要】
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目的：探究羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,HAECs)对成骨细胞迁移和分化的旁分泌作用.方法：从足月剖宫产胎盘上剥离羊膜组织,用胰蛋白酶消化法提取原代羊膜上皮细胞,流式细胞仪分析细胞表型,取P1-P3 用于后续试验.待羊膜上皮细胞融合度达90％时,换新鲜DMEM/F12(10％FBS)培养基,培养24h 后收集培养液,离心后取上清分装冻存,与新鲜DME
【机 构】
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中国医科大学 教育部医学细胞生物学重点实验室暨卫生部细胞生物学重点实验室 干细胞与再生医学研究室,沈阳 110122
【出 处】
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第十届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术会议、第三届中欧创面修复学术会议、中国医师协会创伤外科医师分会创面修复医师专业委
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目的：探究羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,HAECs)对成骨细胞迁移和分化的旁分泌作用.方法：从足月剖宫产胎盘上剥离羊膜组织,用胰蛋白酶消化法提取原代羊膜上皮细胞,流式细胞仪分析细胞表型,取P1-P3 用于后续试验.待羊膜上皮细胞融合度达90％时,换新鲜DMEM/F12(10％FBS)培养基,培养24h 后收集培养液,离心后取上清分装冻存,与新鲜DMEM/F12(10％FBS)培养基1：1 混合后作为条件培养基(conditioned medium,CM),即50％CM.应用孔径为8.0um 的24 孔板transwell 检测细胞迁移,实验组下室放600ml50％HAEC-CM,对照组下室放600ml 新鲜DMEM/F12(10％FBS)培养基,上室接种100ul 无血清DMEM/F12 的人成骨细胞hOB1.19 悬液,接种细胞数为1x105,培养2h 后HE 染色,显微镜下拍照计数.
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为了探讨体外高糖诱发内皮细胞损伤而继发性对人脐带间充质干细胞(humanumbilical cord-derived mesenchymal stem cell,hUC-MSC)增殖和凋亡的影响及其机制,该研究采用酶消化法分离培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,hUVEC),制备不同糖浓度(5,30 mmol/L)培养hUVECs 24
Notch 是进化保守的细胞信号通路，决定细胞命运，参与细胞增殖、分化、凋亡和成人组织修复与再生，维持机体稳态.很多研究证实在创伤修复、疾病、肿瘤中存在Notch通路活性的改变，尤其在全身纤维化疾病中大多表现出过度激活的状态.瘢痕疙瘩是一种真皮纤维增生性肿瘤，表现为成纤维细胞的过分增殖和胶原蛋白的聚积.Notch 信号的异常可能是导致瘢痕疙瘩的一大原因.我们将相关研究进行总结归纳后发现，抑制Not
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