志贺菌主动外排泵调控基因maroR突变与耐药的关系

来源 :第三届晋冀鲁豫流行病学学术会议暨2010流行病学郑州论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:konashu
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目的:探讨临床分离志贺菌调控基因marOR的突变对细菌耐药性的影响。方法:利用重叠延伸PCR扩增4个碱基缺失的marOR基因,与T载体连接后转入DH5α,得到4个碱基缺失的marOR基因克隆株;4个碱基缺失联合3个点突变的marOR基因克隆株是扩增具有该突变菌株的marOR基因,然后与T载体连接后转入DH5α所得;通过凝胶电泳图谱和核酸序列分析证实克隆成功与否;检测DH5α、转入T载体后的DH5α[DH5α(T)]、完整marOR基因克隆株[DH5α(marOR)]、4个碱基缺失的marOR基因克隆株[DH5α(marOR-ACTT)]及4个碱基缺失联合3个点突变的.marOR基因克隆株[DH5α(marOR-CATT+3m)]对多种抗生素的耐药性,并进行比较。结果:按抑菌环直径相差5mm以上为抗生素耐药性有差别:与DH5α(T)比较,DH5α(marOR-ACTT)对链霉素、妥布霉素、先锋V、头孢氨苄的耐药性增加,DH5α(marOR-ACTT+3m)对链霉素和四环素的耐药性增加;与DH5α(marOR)比较,DH5α(marOR-ACTT)和DH5α(marOR-ACTT+3m)对链霉素、四环素、氯霉素、先锋V、左氟沙星、环丙沙星和氟哌酸的耐药性增加;DH5α(marOR-CATT)与DH5α(marOR-CATT+3m)相比对除甲氧苄啶外的实验所用抗生素的抑菌环直径无明显差异。结论:marOR基因第1376-1379处的4个碱基缺失,使志贺菌对部分抗生素的耐药性增加;marOR基因第1411、1417、1435处的点突变对志贺菌的耐药性的影响较小。
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