【摘 要】
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利用离子交换层析和反相层析技术,分离锯缘青蟹(Scyllaserrata)精浆,获得一种新的蛋白多肽.抗菌试验结果表明该多肽对溶壁微球菌(Micrococcuslysoleiksicus)和嗜水气单胞菌(A
【机 构】
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厦门大学近海海洋环境科学国家重点实验室,福建,厦门,361005
【出 处】
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国家“863”计划资源环境技术领域第三届海洋生物高技术论坛
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利用离子交换层析和反相层析技术,分离锯缘青蟹(Scyllaserrata)精浆,获得一种新的蛋白多肽.抗菌试验结果表明该多肽对溶壁微球菌(Micrococcuslysoleiksicus)和嗜水气单胞菌(Aeromonahydrophila)等都有抗菌活性,但抗革兰氏阳性菌的活性更显著.MALDI-TOF质谱测定该肽的分子量为11KDa,并用Edman降解法测定了其N端20个氨基酸序列.应用简并PCR和RACE技术,获得了该肽全长cDNA序列,其cDNA全长564bp,cDNA阅读框架编码126个氨基酸肽段,预测其N端24个氨基酸为信号肽,其余为成熟肽.通过肽指纹图谱测定验证其推导的氨基酸序列的正确性,结果表明所克隆的抗菌肽编码序列是正确的.由于scygonadin的成熟肽理论PI值为6.09,故推断其为是阴离子肽.分析检索基因和蛋白数据库结果显示,该多肽与所有已知的抗菌肽序列无同源性(相似性＜14﹪).基于其分离自锯缘青蟹的性腺,且具有抗菌活性,建议命名该抗菌肽为scygonadin.此外,本研究还确定了其基因序列及其组成,该基因组DNA含2100bp,其中有3个外显子和2个内含子.本研究首次报道从甲壳动物的精浆中分离出一种阴离子肽,Scygonadin的发现为研究锯缘青蟹在潮间带生存的免疫机制以及生殖免疫机制等奠定基础.
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