Serratia liquefaciens磷脂酶A1在大肠杆菌的克隆表达及酶学性质研究

来源 :第三届全国酶制剂研究开发应用技术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mysky_588
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  磷脂酶A1由于其在油脂脱胶、磷脂改性和饲料改良等行业的广泛应用近年来成为研究热点.本研究采用PCR方法得到Serratia liquefaciens的磷脂酶A1基因(phlA),将克隆得到的phlA基因与载体pET-28a(+)构建质粒pET-phlA,转化宿主菌BL21(DE3),实现了去信号肽的磷脂酶A1的表达.利用乳糖自诱导方式,测得发酵液上清酶活63.2 U/mL,细胞破碎液75.8 U/mL,对细胞破碎液的SDS-PAGE分析得到一条约33.2 kDa的特异性条带.该磷脂酶A1的最适作用温度和pH值是55℃和6.0,在70℃保温2h仍具有74%的活力,具有一定的耐热性.
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