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目的:在临床上,干扰素A (IFNA)用于治疗多种肿瘤,通常采用皮下、肌内、静脉给药.IFNA的副反应是剂量相关的,降低全身药物浓度,维持局部浓度能减少副反应,达到更好的治疗效果.目前已有一些研究运用了多种方法来控释、缓释IFNA.这些方法有各自的优缺点.组织工程的原理和方法提示,可以将生物因子与生物材料相结合,以达到缓释、定植生物因子的目的.胶原是一种常见的生物源性的材料,已有许多关于胶原作为药物载体和作为组织工程材料的研究.将IFNA与胶原材料简单复合,仍然存在IFNA易随体液扩散流失的问题.胶原结合域(CBD)是来源于胶原酶的多肽,具有特异性结合胶原的能力.我们设想,将IFNA与CBD进行融合重组,产生IFNA-CBD,提高IFNA对胶原的结合能力,将胶原支架作为IFNA-CBD的载体.通过体内、体外实验研究重组融合的IFNA-CBD的活性、含IFNA-CBD胶原材料的活性,以期构建出一种具有应用潜力的含特异性结合胶原的重组IFNA的生物材料.方法:我们设计、构建了含CBD的IFNA的质粒(pET-28a(+)-IFNA-CBD+).作为对照,我们构建了不含CBD的IFNA的质粒(pET-28a(+)-IFNA-CBD-).用大肠杆菌诱导表达出IFNA-CBD+和IFNA-CBD-目的蛋白.通过对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞的CCK-8实验,研究IFNA-CBD+蛋白的抗肿瘤活性.通过对胶原结合的ELISA实验,研究IFNA-CBD+蛋白结合胶原的能力.将IFNA-CBD+或IFNA-CBD-蛋白与胶原溶液混合制成胶原水凝胶(CH-IFNA-CBD+、CH-IFNA-CBD-),通过ELISA实验研究CH-IFNA-CBD+、CH-IFNA-CBD-的蛋白释放特性.用MCF-7细胞在裸鼠皮下成瘤构建动物模型,在成瘤部位注射CH-IFNA-CBD+和CH-IFNA-CBD-,并以注射PBS和胶原水凝胶为对照组,通过比较裸鼠荷瘤体积和生存时间,初步评价CH-IFNA-CBD+的抗肿瘤活性.结果:MCF-7的CCK-8实验表明,IFNA-CBD+、IFNA-CBD-蛋白有相同的抗肿瘤活性.结合胶原的ELISA实验表明,IFNA-CBD+蛋白结合胶原的能力高于IFNA-CBD-蛋白.CH-IFNA-CBD+较CH-IFNA-CBD-更具有蛋白缓释的特性.动物体内实验表明, CH-IFNA-CBD+组的裸鼠肿瘤体积总体较小,且在治疗后的前7天肿瘤体积出现了明显缩小的情况,CH-IFNA-CBD+组的总体生存期较长,表明CH-IFNA-CBD+有一定的抗肿瘤活性.结论:我们设计了一种含IFNA-CBD+蛋白的胶原水凝胶材料. IFNA-CBD+蛋白既具有抗肿瘤的活性,又具有特异性结合胶原的能力.CH-IFNA-CBD+具有缓释IFNA-CBD+的特性.动物体内实验表明CH-IFNA-CBD+具有一定的抗肿瘤能力.有必要对材料进一步改性以提高应用潜能.