人肌红蛋白全基因合成及原核表达

来源 :中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十七次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lk656lk55lk6
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肌红蛋白(myoglobin,Myo)作为肌细胞损伤后较敏感的检测标志物被广泛应用于临床研究.为得到大量高纯度的Myo,本研究利用两步法合成人肌红蛋白全基因的基础上,构建原核表达载体并通过BL21 (DE3)表达其融合蛋白;将获得的融合蛋白进行His标签特异性亲和纯化.其结果:1)Myo全基因合成:在NCBI查询得到Myo氨基酸序列,并将Myo密码子经过优化得到大肠杆菌惯用的密码子,反转录后得到Myo全序列,并利用两步法合成Myo全基因;2)表达载体构建:将Myo片段并与pMD18-T Simple载体相连,得到重组质粒Myo-pMD18-T Simple.
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