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目的:阐明2009年~2011年7月期间云南边境禽流感H5N1亚型病毒遗传多样性。方法:2009年~2011年7月期间在云南边境采集境外家禽和野生鸟类棉拭子样品,经H5/N1亚型特异性多重RT-PCR检测,在阳性样品中扩增病毒HA基因,克隆至pMD18-T载体测序,并与已知参考毒株序列进行序列比对、同源性及系统发育分析。结果:36份代表性阳性样晶病毒HA基因测序获得15种HA序列,存在2个不同进化分支(2.3.2、2.3.4),2.3.2进一步可划分为3个进化小分支(Ⅱ-1~Ⅱ-3),2.3.4进一步可划分为2个进化小分支(Ⅰ-1和Ⅰ-2)。2.3.2Ⅱ-1、Ⅱ-2毒株是新出现的H5N1亚型病毒变异株。结论:2003年~2011年7月期间云南边境H5N1亚型病毒具有遗传多样性,病毒经历了单一(2.4)—多分支(1、2.3.2、2.3.4、2.4、7)—单一(2.3.4)—多分支(2.3.2、2.3.4)—单一(2.3.2)的进化过程。