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蛋白质糖基化是最重要的翻译后修饰之一，在许多生物过程中发挥着至关重要的作用[1]。蛋白质的N-糖链中，唾液酸化的糖链对蛋白生物功能的影响尤为重要。但由于其相对水平通常较低，且难以离子化，因此检测灵敏度一般较低。我们以人血清IgG为模式糖蛋白，建立了一种特异性检测唾液酸化N-糖链的方法。该方法首先采用PNGase F酶水解IgG上的糖链，富集酸性糖后采用 2D-nano-LC-Chip/Q-TOF MS进行分析。通过优化色谱条件以及质谱各项参数，我们建立的方法可以检测到IgG上的79种唾液酸化糖链，是迄今为止检测唾液酸化糖链种类最多的一种方法。同时，我们所建立的方法能够实现多组同分异构体糖链的分离，为了解不同连接方式的糖链功能提供了重要方法。采用该方法我们还对大鼠血浆中糖蛋白的N-糖基化进行了分析，结果鉴定出200种糖链，包括13种新的带乙酰基的唾液酸化N-糖链，为我们利用大鼠进行有关糖基化生物学的研究提供了重要的工具。