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目的:探讨miRNA-155对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响,研究MiRNA-155影响乳腺癌细胞功能改变的作用机制.
方法:通过转染技术建立过表达及缺表达miRNA-155的乳腺癌MDA-MMB-231细胞系,并用Real-time PCR验证转染情况;通过MTS法和平板克隆形成实验检测转细胞增殖能力的改变;Transwell迁移试验和细胞划痕试验检测细胞迁移和侵袭能力的改变;在此基础上通过Real-time PCR和Western blot探讨乳腺癌细胞生物学功能改变的作用机制.
结果:Real-time PCR结果显示转染miRNA-155mimics增加miRNA-155表达量,而转染miRNA-155 inhibitor降低miRNA-155表达量。在乳腺癌MDA-MB-231中,过表达miRNA-155后提高细胞的增殖能力和迁移侵袭能力,反之,能力减弱。Real-time PCR结果表明nuRNA-155 mimics增加其MMP16的mRNA表达量增高,反之减少。Western blot进一步证实了miRNA-155 mimics下调靶蛋白SOCS1表达水平,上调MMP16表达水平。而转染了miRNA-155 inhibitor后,上调SOCS1蛋白表达水平,下调MMP16蛋白水平。
结论:miRNA-155对乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖能力和迁移能力显著增强;miRNA-155在乳腺癌细胞中可能起到肿瘤致癌基因的作用。初步认为其miRNA-155通过作用于抑制靶基因SOCS1在肿瘤细胞增殖和迁移中发挥重要作用,同时可能间接通过增加MMP16促进细胞迁移能力。