【摘 要】
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目的：获得剧毒海洋生物毒素膝沟藻毒素1/4 (Gonyautoxin 1/4,GTX 1/4)高亲和力、强特异性的适配体.方法：通过指数富集的配基系统进化技术(Systematic Evolution of Ligands
【机 构】
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第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室;第二军医大学海洋军事医学院海洋医药研究中心中国人民解放军总装备部防化研究院
【出 处】
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第四届吴宪吴瑞国际学术研讨会、第九届全国医学生物化学与分子生物学、第六届全国临床应用生物化学与分子生物学联合学术讨论会
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目的：获得剧毒海洋生物毒素膝沟藻毒素1/4 (Gonyautoxin 1/4,GTX 1/4)高亲和力、强特异性的适配体.方法：通过指数富集的配基系统进化技术(Systematic Evolution of Ligands by EXponential enrichment,SELEX)筛选GTX 1/4适配体.用生物膜干涉技术(BLI)和等温滴定量热法(ITC)分析适配体与GTX 1/4结合的动力学参数.基于mfold软件预测适配体二级结构,截短和突变优化适配体.通过圆二色谱法(CD)分析毒素GTX1/4结合适配体时构象的变化.结果：分别利用氧化石墨烯吸附游离DNA特性和GTX 1/4化学偶联于磁珠后SELEX筛选GTX 1/4适配体,两种筛选方式所得适配体的Kd值分别在10nM和u M级.CD谱显示GTX 1/4能够诱导适配体构象发生显著的变化.截短和突变等优化,可以进一步提高适配体与GTX 1/4的亲和力.结论：氧化石墨烯SELEX筛选GTX 1/4适配体有着更高的效率,所得适配体为快速检测GTX 1/4,及其解毒研究提供了起始序列.
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