黑曲霉sod C基因缺失体的构建及生理特性分析

来源 :中国植物病理学会产后病理专业委员会2016年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:phlok1985
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  黑曲霉是采后果实中常见的致病真菌之一.超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)是生物体防御氧化损伤的一种重要的金属酶类,在黑曲霉中有Cu-Zn 型SOD C 和Mn 型SOD B,编码的基因主要有sod B、sod C、An04g01170、An04g04870、An07g09250、An08g06210、An16g05520 等.为探究超氧化物歧化酶sod C 基因的缺失是否会对受黑曲霉侵染的采后果蔬的致病性造成影响,本文利用同源重组的原理,敲除了黑曲霉(A.niger MA70.15)中的sod C 基因,并比较了黑曲霉的野生型A.niger MA70.15 和缺失体△sod C 的生理特性.通过对野生型与缺失体在PDA 培养基上培养及对其表型的观察,发现两者在正常的培养基条件下包括生长量,菌斑直径等方面均无差异,表明在正常的体外培养条件下,黑曲霉中sod C 基因的缺失对其生长无影响.将野生型A.niger MA70.15 和缺失体△sod C 的孢子悬液分别接种到梨果实上,比较两者对梨果实的侵染能力,通过检测两者的菌斑直径,发现缺失体△sod C 侵染梨果实所造成的菌斑直径,明显小于野生型.进一步对两者的菌体进行RNA 提取并进行荧光定量PCR,发现缺失体△sod C 体内编码sod 基因(主要有sod B、sod C、An04g01170、An04g04870、An07g09250、An08g06210、An16g05520)的表达量均低于野生型.上述结果表明,黑曲霉体内的sod C,在果实侵染过程中,起到了重要的作用,而相关机理仍需深入研究.
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