【摘 要】
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目的:探讨体外尼古丁对大鼠肌腱干细胞(tendon-derived stem cells,TDSCs)的细胞活力,细胞早期凋亡以及肌腱相关基因表达的影响,揭示吸烟导致肌腱病变以及损伤肌腱延迟愈合潜在的细胞学发病机制.方法:无菌条件下取8周龄SD大鼠的肌腱,Ⅰ型胶原酶消化分离获得单个有核细胞,以最适密度(50个/cm2)进行接种,细胞呈克隆样生长,获得原代TDSCs.基础培养细胞至第3代,将其分为两
【机 构】
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东南大学附属中大医院;东南大学附属中大医院无锡分院 东南大学附属中大医院
【出 处】
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中国长江医学论坛——2015骨科学年会暨江苏省第十七次骨科学学术会议
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目的:探讨体外尼古丁对大鼠肌腱干细胞(tendon-derived stem cells,TDSCs)的细胞活力,细胞早期凋亡以及肌腱相关基因表达的影响,揭示吸烟导致肌腱病变以及损伤肌腱延迟愈合潜在的细胞学发病机制.方法:无菌条件下取8周龄SD大鼠的肌腱,Ⅰ型胶原酶消化分离获得单个有核细胞,以最适密度(50个/cm2)进行接种,细胞呈克隆样生长,获得原代TDSCs.基础培养细胞至第3代,将其分为两组,实验组用不同浓度的尼古丁培养基(10-7M,10-6M,10-5M,10-4M和10-2M)干预,对照组继续采用基础培养基(0M)培养.处理6h、24h、48h和72h后分别应用四唑盐(MTT)比色法检测尼古丁对TDSCs体外存活的影响,72h后应用Annexin V-FITC/PI双染法检测尼古丁对TDSCs体外早期凋亡的影响,实时荧光定量PCR(Realtime PCR)检测肌腱相关基因Collal和Scx的表达.
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