【摘 要】
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本文针对多份从广东阳江某猪场采集的疑似猪伪狂犬(PRV)感染猪的病变组织进行病毒核酸分析,分别应用PRV gB,gE和TK基因引物进行聚合酶链式反应(PCR)分析,结果显示以上基因均为阳性,结合该猪场发病猪临床表现,确认为PRV野毒感染。将该PRV野毒感染脑组织进行研磨、冻融和过滤除菌,接种健康新西兰兔,实验兔在1-2天后出现明显神经症状,并迅速死亡。取濒死兔脑组织,再次经研磨、冻融和过滤除菌后接
【机 构】
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广东海大畜牧兽医研究院有限公司,广州,511400
【出 处】
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2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微
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本文针对多份从广东阳江某猪场采集的疑似猪伪狂犬(PRV)感染猪的病变组织进行病毒核酸分析,分别应用PRV gB,gE和TK基因引物进行聚合酶链式反应(PCR)分析,结果显示以上基因均为阳性,结合该猪场发病猪临床表现,确认为PRV野毒感染。将该PRV野毒感染脑组织进行研磨、冻融和过滤除菌,接种健康新西兰兔,实验兔在1-2天后出现明显神经症状,并迅速死亡。取濒死兔脑组织,再次经研磨、冻融和过滤除菌后接种VERO细胞,细胞在12小时内出现病变,对病变细胞进行冻融后再次接种,传代至第5代。利用"蚀斑法"对PCR检测仍为PRV阳性的病毒液进行纯化,经过三次"蚀斑法"纯化筛选后,共得到6株对VERO细胞具有不同感染特性的PRV病毒。选择一株细胞病变较强的毒株(PRV GD-1406)为研究对象进行活体致病性分析。应用等剂量PRV GD-1406病毒分别液肌肉注射和滴鼻接种8日龄仔猪,人工哺乳,连续观察,结果发现,肌肉注射组的仔猪2周内无明显病症；而滴鼻组仔猪出现发抖、扎堆,滴鼻1-3天体温持续升高至42℃,发病仔猪呼吸困难、犬坐、顶撞栏柱、呕吐、虚弱的症状,并且出现角弓反张、划水等典型的猪伪狂犬病毒感染症状。另外,将PRV母源抗体均为阳性(疫苗毒为Bartha-K61株)的仔猪用PRV GD-1406进行攻毒,仔猪均出现类似PRV病症,利用等剂量Bartha-K61株进行攻毒的对照组猪无症状,实验说明PRV Gd-1406血清型与BarthaK61株有显著差异。本实验从PRV阳性病变组织中分离、纯化出一株对VERO细胞具有较强致病性的PRV病毒(命名为：PRV GD-1406),人工感染实验表明,PRV GD-1406对易感动物具有较强的致病作用,较高的PRV母源抗体不能抵抗该病毒滴鼻感染,据此,我们认为PRV GD-1406株可作为PRV疫苗研究的候选毒株。
其他文献
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猪Delta冠状病毒(Porcine Delta Coronavirus,PDCoV)是一种能够引起仔猪腹泻的新型冠状病毒,2014年该病毒在美国的猪群中爆发并造成普遍流行,给健康养猪带来了严重的威胁.由于PDCoV是近年来新发现的一种冠状病毒,其病原学相关特性尚未完全解析,给预防和控制该病原的感染与流行增加了难度.PDCoV的N蛋白是相对保守且免疫原性较好的蛋白,在PDCoV的诊断上具有重要价值
Classical swine fever (CSF) is a highly contagious swine infectious disease and causes significant economic losses for the pig industry worldwide.The objective of this study was to determine whether s
狂犬病的诊断"金标准"是WHO和OIE共同推荐的直接免疫荧光实验(FAT)，但是FAT方法需要昂贵的仪器、熟练的技术，才能做出准确的结果判定。对于大多数经济欠发达的狂犬病流行国家和地区来说，由于缺乏必要基础设施和昂贵的仪器设备，很难开展狂犬病的监测和确诊。直接快速免疫组化法(dRIT)整个实验过程在室温条件下就可完成，最重要的是结果只需光学显微镜即可观察，突破了昂贵实验设备的限制。但目前尚没有商品
伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病毒(Pseudo rabies virus,PRV)感染多种家畜与野生动物出现以发热、奇痒、呼吸和神经系统症状为特征的急性传染病.2011年底以来,我国数十省份相继爆发伪狂犬病并呈扩大流行趋势,研究表明：我国出现了伪狂犬病毒变异株,导致猪伪狂犬病在我国重新爆发流行.与经典毒株相比,变异株抗原性存在差异、毒力明显增强、基因序列存在不同程度改变,现
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