【摘 要】
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论文目的：研究社区获得性金黄色葡萄球菌(CA-SA)流行克隆株ST398Ess系统中EsaA,EssA,EssC三个膜蛋白的功能,探究其影响金黄色葡萄球菌毒力的机制.论文方法：从ST398临床分离株中选取典型菌株作为野生株进行实验.以PKOR1质粒作为载体,采用等位基因同源重组的方法,分别敲除Ess系统中三个膜蛋白的编码基因essA,esaA,essC,得到相应的敲除株△essA, △esaA,
【机 构】
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上海交通大学医学院附属仁济医院检验科
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论文目的：研究社区获得性金黄色葡萄球菌(CA-SA)流行克隆株ST398Ess系统中EsaA,EssA,EssC三个膜蛋白的功能,探究其影响金黄色葡萄球菌毒力的机制.论文方法：从ST398临床分离株中选取典型菌株作为野生株进行实验.以PKOR1质粒作为载体,采用等位基因同源重组的方法,分别敲除Ess系统中三个膜蛋白的编码基因essA,esaA,essC,得到相应的敲除株△essA, △esaA, △essC；同时以POS1质粒作为回补载体,分别构建三个膜蛋白编码基因的回补株p-essA,p-esaA,p-essC.通过生长曲线测定、半定量溶血实验、半定量生物膜形成实验等检测野生株与各敲除株及回补株的表型变化；采用中性粒细胞杀伤实验、裸鼠皮肤脓肿模型和小鼠菌血症模型等分别从体外和体内两个水平研究野生株和敲除株细菌的毒力差异；使用western blot的方法检测野生株和敲除株分泌上清中Ess系统重要毒力蛋白EsxA的表达情况,进一步阐明三个膜蛋白影响细菌毒力的机制.
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