【摘 要】
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目的:首次运用RNA-seq技术研究针刺对急性缺血再灌注心肌基因表达谱的影响.方法:60只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、电针组,每组20只.以结扎左前降支致缺血30min,再灌注4h方式建立缺血再灌注模型,其中电针组于造模前选取双侧"内关"穴进行电针预处理2周.采用心律失常评分、血清酶学的检测、缺血坏死面积TTC染色进行疗效评价;取缺血心肌提取RNA,运用RNA-seq高通量测序观察
【机 构】
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南京中医药大学第二临床医学院,江苏南京,210023 南京中医药大学第二临床医学院,江苏南京,21
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目的:首次运用RNA-seq技术研究针刺对急性缺血再灌注心肌基因表达谱的影响.
方法:60只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、电针组,每组20只.以结扎左前降支致缺血30min,再灌注4h方式建立缺血再灌注模型,其中电针组于造模前选取双侧"内关"穴进行电针预处理2周.采用心律失常评分、血清酶学的检测、缺血坏死面积TTC染色进行疗效评价;取缺血心肌提取RNA,运用RNA-seq高通量测序观察其全基因组表达谱变化,实时定量PCR技术进行验证,并运用TopHat、CASAVA等方法进行数据分析.
结果:1.与模型组比较,电针组的心律失常评分降低50%(P<0.05);LDH、CK、CK-Mb下降74.23%、81.66%、57.91%(P<0.05);心肌缺血面积减少62.14%(P<0.05)。2.RNA-seq高通量测序结果显示,与假手术组比较,模型组下调了1165条基因,其中325条在电针后上调;模型组上调了912条基因;其中172条在电针后下调。模型组下调中电针组上调的通路包括:细胞凋亡、肿瘤坏死因子、自然杀伤细胞介导的细胞毒作用、T细胞活化、血管生成、Toll样受体信号转导等通路。模型组上调中电针组下调的通路包括:钙离子通道、ECM受体相互作用、Notch信号通路等。
结论:电针预处理可能通过影响上述基因表达变化实现保护大鼠心肌缺血再灌注损伤的效应。
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