【摘 要】
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先天性心脏病(Congenital Heart Disease,CHD)是一种常见的先天畸形,由遗传因素与环境因素共同作用引起,其中遗传因素发挥重要作用,遗传率为55％～65％.心脏的发育过程受多种转录因子调控,其中T-box家族的TBX20基因参与调控心脏的增殖,分化以及心房的形成等,在心脏的发育过程中具有十分重要的作用.目的 研究靶向干扰Tbx20基因表达对心肌细胞凋亡和增殖的影响.方法 人工
【机 构】
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中国医科大学医学遗传学教研室,沈阳 110001
【出 处】
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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议
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先天性心脏病(Congenital Heart Disease,CHD)是一种常见的先天畸形,由遗传因素与环境因素共同作用引起,其中遗传因素发挥重要作用,遗传率为55％～65％.心脏的发育过程受多种转录因子调控,其中T-box家族的TBX20基因参与调控心脏的增殖,分化以及心房的形成等,在心脏的发育过程中具有十分重要的作用.目的 研究靶向干扰Tbx20基因表达对心肌细胞凋亡和增殖的影响.方法 人工合成Tbx20特异的siRNA,转染大鼠H9c2心肌细胞后,通过Real-Time PCR、Western Blot技术检测干扰前后H9c2心肌细胞Tbx20在mRNA和蛋白水平的表达变化；采用Tunel和流式细胞法检测细胞凋亡的变化；CCK8法检测对细胞增殖的抑制作用,流式细胞法检测细胞周期的变化.结果 人工合成的3个特异性siRNA均可不同程度地抑制H9c2细胞Tbx20基因在mRNA和蛋白水平的表达,以siTbx20-1089抑制效率最高.siTbx20-1089转染48小时后与未转染组相比,Tunel和流式细胞检测显示的凋亡率分别为(17.33±0.013)％,(11.58±1.27)％；siTbx20-1089转染72小时后与未转染组相比,细胞增殖活力受到抑制,抑制率为(48.3±0.065)％；细胞周期重新分布,G2/M期上升为(6.38±0.954)％,G1期下降为(67.69±1.258)％.结论 Tbx20靶向siRNA能有效地诱导H9c2细胞的凋亡,抑制细胞的增殖,阻滞细胞于G2/M期.
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