【摘 要】
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低聚木糖作为功能因子,具有显著的双歧杆菌增殖能力,抗消化性,无龋齿性及促进人体对钙的吸收等生理活性.研究表明:α-葡萄糖醛酸酶和木聚糖酶的联合作用能够提高低聚木糖的产
【机 构】
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南京师范大学金陵女子学院食品科学与工程系,南京市宁海路122号,210097江苏省生物质能与酶技术重点实验室(淮阴师范学院),江苏省淮安市长江西路111号,223000
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低聚木糖作为功能因子,具有显著的双歧杆菌增殖能力,抗消化性,无龋齿性及促进人体对钙的吸收等生理活性.研究表明:α-葡萄糖醛酸酶和木聚糖酶的联合作用能够提高低聚木糖的产量和纯度.极端嗜热菌海栖热袍菌Thermotoga maritima所产木聚糖酶B(XynB)和α-葡萄糖醛酸酶(AguA)热稳定性好,极具工业应用潜力.为了提高XynB和AguA生产效率并降低生产成本,我们利用基因重组技术将XynB和AguA基因置于不同表达盒下构建多顺反子表达载体pET-20b-xynB-rbs-aguA和双启动子表达载体pET-20b-xynB-T7pr-aguA,分别转化宿主菌Escherichia coli JM109(DE3)后进行XynB和AguA共合成显示,重组菌E.coli JM109 (DE3)/ pET-20b-xynB-rbs-aguA 比 E.coli JM109 (DE3)/pET-20b-xynB-T7pr-aguA产酶更高,在LB培养基中诱导培养6h,XynB和AguA产量分别达1.52U/mL和0.32U/mL且双酶液XynB/AguA活性比最高(1:0.211),进一步水解桦木木聚糖和检测还原糖显示,其还原糖释放含量高达40.39 mg/ml,比单一木聚糖酶解液(25.09mg/ml)高15.3 mg/ml,且木二糖含量和纯度更高.这些研究结果为低聚木糖生产提供了一种获得高产木二糖工程菌的可行途径.
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