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本文将虫媒介黄病毒基因3末端通用引物EMF1／VD8做为鉴别引物，以鸡黄病毒(chicken flavivirus，CFV)分离株CJD-05为模板，建立了检测CFV的RT-PCR方法。结果显示：该方法能从CFV和鸭黄病毒(duck flavivirus，DFV)中扩增到与预期大小相符长度为708bp的特异性目的片段，检测灵敏度达到3pg病毒RNA，而其它病毒如鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、番鸭呼肠孤病毒(MDRV)、禽呼肠孤病毒(ARV)、番鸭细小病毒(MDPV)、鹅细小病毒(GPV)、新城疫病毒(NDV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、禽流感病毒H9(AIV-H9)和鸡减蛋综合征病毒(EDsV-76)等样品的扩增结果均为阴性。应用该方法对3株CFV分离毒、1株DFV分离毒和5份人工感染鸡卵泡与输卵管组织匀浆进行检测均为阳性。表明虫媒介黄病毒RT-PCR通用引物可用于鸡(鸭)黄病毒的临床诊断和流行病学调查。