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肠炎沙门氏菌(SE)感染是一种重要的人畜共患病,传统鉴定SE的方法尚存在不足,因此有必要建立一种检测该菌的特异性PCR方法。
根据GenBank 登录的SE种特异性DNA序列,设计合成了一对能特异性扩增293bpDNA片段的引物,首次建立了SE的种特异性聚合酶链式反应(PCR)诊断方法。
该方法能特异性扩增SE;检测SE的最低DNA模板量为50pg/mL,最少检测到的细菌数为19CFU/mL。对10只SE人工感染死亡雏鸭的心、肝和粪便的检测结果与细菌分离的结果符合率为100%,而对脾、脑、法氏囊的检测阳性率极显著(P<0.01)高于细菌分离率;应用该技术对临床送检的228 只疑似SE 感染死亡鸭病例检测结果也显著高于细菌分离法。研究结果表明,建立的PCR方法检测SE具有较好的特异性和敏感性,比传统的细菌分离鉴定更加快捷、准确,可用于SE分离鉴定、SE感染疑似病例的检测及其分子流行病学调查。