【摘 要】
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目的:克隆并表达中国莱姆病螺旋体Borrelia garinii基因型菌株IM11的外膜蛋白A(OspA),并对其免疫保护性进行初步研究,为进一步研制莱姆病菌疫苗提供基础.方法:用聚合酶链反应(PCR)从莱姆病螺旋体IM11全基因组DNA中将OspA基因调出,插入原核表达载体P42,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达产物用SDS-PAGE、Western-Blotting分析.用重组OspA
【机 构】
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中国疾病预防控制中心传染病预防控制所(北京) 中牧实业股份有限公司研发中心(北京)
【出 处】
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中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会
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目的:克隆并表达中国莱姆病螺旋体Borrelia garinii基因型菌株IM11的外膜蛋白A(OspA),并对其免疫保护性进行初步研究,为进一步研制莱姆病菌疫苗提供基础.方法:用聚合酶链反应(PCR)从莱姆病螺旋体IM11全基因组DNA中将OspA基因调出,插入原核表达载体P42,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达产物用SDS-PAGE、Western-Blotting分析.用重组OspA(rOspA)免疫新西兰家兔,用间接免疫荧光(IFA)检测其血甭特民异性抗体(IgG),并进行体外中和试验,从而对其免疫保护性有初步的了解.结果:rOspA在宿主菌内表达高效、稳定;Western-Blotting显示其与抗OspA的多抗有较好的免疫反应性;用rOspA免疫新西兰家兔后,其血清抗体(IgG)效价显著升高(32倍),体外中和试验表明,每毫升兔抗rOspA血清可杀灭105个莱姆病螺旋体.结论:rOspA有较好的免疫保护性,可作为多价兽用莱姆病疫苗的一种成分.
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