【摘 要】
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本试验研究了猪瘟病毒的E2蛋白重复多抗原表位基因的PCR扩增及分子克隆,构建了重复多表位基因的原核重组表达质粒PGEX-3E,实现了融合蛋白GST-E和多表位融合蛋白GST-3E的可溶性表达.ELISA和Western blot方法测定了单表位融合蛋白GST-E和多表位融合蛋白GST-3E与猪抗CSFV的阳性血清和兔抗E2阳性血清的反应性,并进行了融合蛋白的兔体免疫及免疫攻毒保护的比较研究.结果表
【机 构】
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解放军军需大学军事兽医研究所病毒室(长春)
【出 处】
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中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会
论文部分内容阅读
本试验研究了猪瘟病毒的E2蛋白重复多抗原表位基因的PCR扩增及分子克隆,构建了重复多表位基因的原核重组表达质粒PGEX-3E,实现了融合蛋白GST-E和多表位融合蛋白GST-3E的可溶性表达.ELISA和Western blot方法测定了单表位融合蛋白GST-E和多表位融合蛋白GST-3E与猪抗CSFV的阳性血清和兔抗E2阳性血清的反应性,并进行了融合蛋白的兔体免疫及免疫攻毒保护的比较研究.结果表明,单表位融合蛋白与猪的阳性血清无反应,重复多表位融合蛋白则能够与猪的阳性血清反应;单表融合蛋白和多表位融合蛋白与兔抗E2阳性血清均能够产生强烈的免疫反应.在刺激兔体产生抗体方面,单表位融合蛋白刺激兔体产生抗体的能力较弱,而多表位融合蛋白则能够使兔体产生高效价的抗体.接种100MID剂量HCLV进行的兔体免疫攻毒保护试验表明,空白对照组和载体蛋白GST免疫组无保护作用,单表位融合蛋白免疫组具有一定的免疫保护作用,而重复多表位融合蛋白免疫组则完全能够抵抗猪瘟病毒的攻击.本实验的成功完成为猪瘟病毒多表位的抗原串联及多表位疫苗的研究奠定了基础.
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