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内生真菌是指在生活史的某段时期生活于植物组织内部,对宿主没有造成明显病害症状的真菌,在植物组织中普遍存在.2010年11月,从浙江省绍兴市采集桂花(Osmanthus fragrans Lour.)的叶片、1年生枝条、2年生枝条和3年生枝条作为研究标本分离内生真菌.自256个表面消毒的组织块中分离到内生真菌纯培养物403株.产孢菌株根据主要形态特征进行鉴定,酵母菌根据D1/D2序列同源性判定分类地位.可以产孢内生真菌共387株,被鉴定为7种腔孢菌包括Collectotrichum musae (Berk.&Curt.)Arx.、Diplodina galii Sacc.、Microsphaeropsis sp.、Pestalotiopsis microspora (Speg.) Batista& Peres、Phoma sp、1、Phoma sp.2、Phomopsis pterophila (Nits.) Died.；2种子囊菌包括Glomerella sp、Xylaria sp.；9种丝孢菌包括Alternaria alternata (Fr.) Keissler.、Cladosporium sp.、Epicoccum nigrum Link、Fusarium sp.、Humicola sp.、Nigrospora oryzae (Berk.& Br.)Petch、Nigrospora sphaerica (Sacc.) Mason、Nodulisporium sylviforme Deighton、Scopulariopsis sp.,涉及16属18种.酵母菌被鉴定为Bullera cylindrica、Bullera nakasei、Bulleromyces albus、Cryptococcus cellulolyticus、Cryptococcus Podzolicus、Fellomyces polyborus、 Trichosporon moniliiforme,涉及5属7种.另外有0.5％的内生真菌经过组织诱导之后仍然不能产孢,根据培养特征和显微观察结果,确定为Morphotype 1和Morphotype 2.Phomopsis pterophila (Nits.) Died.是桂花内生真菌的优势种.桂花三年生枝条中内生真菌的定植率和分离率最高,分别为100％和2.23,而且内生真菌定植率和分离率表现出随组织年龄的增长而逐渐增加的生态分布规律.根据Sorenson公式计算,桂花叶片与枝条间内生真菌相似性系数为0.56-0.58,1、2和3年生枝条间内生真菌相似性系数为0.72-0.8,说明桂花的不同组织间内生真菌组成存在差异.根据Shannon-Weiner指数,桂花技条中内生真菌的多样性指数明显高于叶片,而且随着枝条组织年龄的增加,多样性指数随之升高,说明内生真菌的丰富程度受组织性质及其组织年龄的影响.根据主成分分析和聚类分析并结合桂花的叶片与枝条内生真菌组成的相似性系数,可以看出桂花内生真菌的分布存在组织偏好性.