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[目的]喹诺酮类(QNS)和庆大霉素(GEN)均为广谱、高效抗生素,对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有显著的抗菌效果,因此是我国农业、畜牧业和水产业中常用的兽药,也常被添加到饲料中促进动物的生长发育[1,2].随着这两类药物在畜牧养殖业的不断应用,其残留问题日趋严重,其在动物性食品中的残留不仅危害人的身体健康,如QNS可引起恶心,呕吐,影响软骨发育,GEN具有耳毒性和肾毒性,还污染环境、影响新药开发和临床用药,而且不利于养殖业的健康发展及畜禽产品的出口；更为严重的是动物性食品中残留较低浓度的药物容易诱导人类致病菌产生耐药性,不利于该类药物对人类疾病的治疗.为严格控制这两类抗生素在动物源食品中的残留,保证人民身体健康,保证进出口产品质量,提高我国畜产品的国际信誉,我国农业部第235号公告对这两类药物在动物源性食品中的最高残留限量(MRLs)均作了明确规定[3].因此,研究这两类药物的残留检测方法对我国的食品安全监测具有非常重要的意义.目前国内外用于动物源食品中QNS和GEN残留检测的分析方法主要有免疫分析法[4]和色谱-质谱联机等仪器检测方法[5].免疫分析法是近年来快速发展的一种方法,具有灵敏度高、特异性强、适用范围广、操作简便、快捷、成本低廉及现场适应能力强等优点.胶体金免疫层析法与其他免疫方法如ELISA相比,样品前处理简单,不需任何仪器,结果可在5-10 min内获取,且对操作人员没有专业要求,非常适合现场大批量样本的筛选.目前国内外还未出现可同时检测QNS和GEN两类药物的胶体金免疫方法的报道.本研究的目的为建立同时检测牛奶中QNS和GEN两类药物残留的胶体金免疫层析方法.[方法]本研究采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,采用棋盘法最终确定抗体标记的最佳pH值和最佳抗体用量,并首次对喹诺酮类和庆大霉素单抗进行混合标记.[结果]试验结果表明该方法对牛奶中13种喹诺酮类药物和庆大霉素的检测限均为20 ng/mL.牛奶样本直接检测,无需处理,整个过程5 min内完成.[结论]采用该方法和HPLC-MS/MS对60份牛奶盲样进行对比检测,阳性样品全部检出,同时筛选方法未出现假阳性和假阴性现象,说明二者的测定结果基本相符,表明该方法准确可靠,适用于现场大批量样本的快速检测和筛选.