【摘 要】
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目的 利用超声靶向破碎微泡(UTMD)联合经典核定位肽SVT40提高hAng-1基因体内转染效率,治疗犬心肌梗死.方法 将18只犬建成心肌梗死模型后随机分为3组,即A组：UTMD+SVT40核定位信号肽+hAng-1基因转染组；B组：UTMD+ hAng-1基因转染组；C组：hAng-1基因转染组；心梗模型建成后1周,经静脉注入超声微泡,同时超声辐照心前区.建模前、建模后及转染后1个月分别行超声检
【机 构】
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430060武汉市,武汉大学人民医院超声影像科
【出 处】
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第三届全国暨国际超声分子影像及生物效应和治疗学术会议
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目的 利用超声靶向破碎微泡(UTMD)联合经典核定位肽SVT40提高hAng-1基因体内转染效率,治疗犬心肌梗死.方法 将18只犬建成心肌梗死模型后随机分为3组,即A组：UTMD+SVT40核定位信号肽+hAng-1基因转染组；B组：UTMD+ hAng-1基因转染组；C组：hAng-1基因转染组；心梗模型建成后1周,经静脉注入超声微泡,同时超声辐照心前区.建模前、建模后及转染后1个月分别行超声检查,二维超声心动图检测各组犬射血分数和室壁运动情况,心肌声学造影检查各组家兔心肌血流灌注情况.基因转染后1个月处死各组犬并从三组各随机挑选犬5只,取心脏标本,RT-PCR和Western Blot、ELISA分别从基因和蛋白水平检测心肌组织hAng-1基因的表达效率,免疫组织化学法(IHC)检测梗死心肌周边区CD34的表达,并在显微镜下计数心肌内新生微血管密度(MVD),Masson染色检测心肌梗死区纤维化程度及瘢痕面积.比较三组基因转染治疗效果.结果 心梗建模前,3组犬室壁运动及心功能正常,心肌造影各室壁未见充盈缺损.心梗建模后1周,三组犬左室前壁运动幅度及左室射血分数均明显减低,心肌造影均显示前壁心肌充盈缺损,三组间差异无统计学意义；转染后1个月A组心功能轻度增高,B组轻度减低,C组明显恶化,心肌造影显示A组梗死及周围区较多造影剂充填,B组少许造影剂充填,C组充盈缺损,三组间差异有统计学意义(P＜0.01).ELISA和RT-PCR半定量检测结果显示A组表达较B组高,B组表达较C组高；三组间hAng-1蛋白表达趋势与RT-PCR结果一致；hAng-1蛋白表达A组是B组2倍是C组4倍,IHC结果显示新生的微血管被染成棕黄色,A组的MVD最高,与其他各组比较差异均有统计学意义(均P＜0.01).Masson染色显示A组梗死区厚度、瘢痕面积和心肌纤维化程度均较B、C组明显改善.结论 超声微泡(UTMD)联合核定位信号肽SVT40能够介导hAng-1基因在缺血心肌内的高效表达,并促进血管新生和改善纤维化,为缺血性心脏病的基因治疗提供一种新的基因转移途径.
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