猪链球菌分泌核酸酶A作为区分猪链球菌感染分子标识的初探

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会教学专业委员会第六届第12次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lkjh321
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猪链球菌的致病性与其毒力因子相关,目前猪链球菌的毒力因子主要有溶菌酶释放蛋白、胞外因子、溶血素、荚膜多糖等。近年来,还发现了一些潜在的毒力因子,主要有:分泌核酸酶(Secreted Nuclease A,SsnA)、38KD免疫保护性抗原、致病性基因-orf2等。研究表明,分泌核酸酶A(SsnA)的表达水平和分离的位置有密切大关系。即深层组织分离的细菌大部分表现为SsnA阳性,而浅层组织分离菌则表现为阴性。针对这一现象,推测SsnA蛋白可能可以作为区分猪链球菌感染已否的一个指标。本实验针对SsnA这一特点,克隆表达了SsnA蛋白,经蛋白纯化,可达浓度90%。利用纯化的SsnA蛋白建立ELISA方法,来区分猪链球菌感染和免疫。结果显示,将384份免疫阳性血清用SsnA包被的ELISA板(SsnA-ELISA)检测,共有88份血清OD630>0.4,即为阳性,阳性率为22.9%。而在37份感染的血清中,用荚膜多糖(CPS)检测均为阳性。用SsnA纯化蛋白包被的ELISA检测,有30份血清OD630>0.4,阳性率为81.1%。结果初步说明,SsnA是可以作为猪链球菌区分感染与免疫的一个指标。
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