牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体捕获ELISA方法的建立

• 作 者: 钟发刚[1]程安春[2]王新华[3]邓宇[3]郭燕[3]
• 机 构: 四川农业大学动物医学院 四川,雅安 625014 新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室 新疆,石河子,832000
• 出 处: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会教学专业委员会第六届第12次学术研讨会
• 发表日期: 2008年期

以纯化的牛病毒性腹泻病毒（BVDV）作为抗原免疫BALB/C系小鼠，通过细胞融合和克隆筛选出稳定分泌BVDV抗体的杂交瘤细胞株，将杂交瘤细胞接种BALB/C系小鼠的腹腔内诱生腹水，腹水单抗与BVDV均呈阳性反应。将5A9、2G3和5C2（分别结合不同的抗原结合位点）诱生的BVDV单抗纯化后等量混合包被酶标板，与鸡抗BVDV IgY(检测抗体)联合应用,建立BVDV抗原捕捉ELISA(AC-ELISA)方法.采用方阵滴定法确定单抗、鸡抗BVDV IgY的最适工作浓度，用阴性组织样品确定判定检测结果的OD490临界值，最后以建立的BVDV AC-ELISA检测临床粪样23份，结果表明：该方法敏感性、特异性高，与病毒分离和RT-PCR方法的符合率达93.33％和83.33％。