【摘 要】
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扩增了E. coli JM109中的醛脱氢酶基因(aldA),构建了诱导型表达载体pUC18-aldA-Tet,导入Klebsiella pneumoniaeATCC25955 后获得了表达含醛脱氢酶基因的重组菌Klebsiella pne
【机 构】
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南京工业大学生物与制药工程学院,南京,210009 南京工业大学材料与化学工程国家重点实验室,南京,210009
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扩增了E. coli JM109中的醛脱氢酶基因(aldA),构建了诱导型表达载体pUC18-aldA-Tet,导入Klebsiella pneumoniaeATCC25955 后获得了表达含醛脱氢酶基因的重组菌Klebsiella pneumoniae/pUC18-aldA-Tet.通过对该酶表达条件考察,得到了该酶表达的最佳条件:重组菌在1.0 mmol/L IPTG 诱导6 h,pH为7.0,温度为40℃条件下,该酶的催化活力较显著;对几种不同作用底物催化活力比较发现:该酶作用的最佳底物为乙酰-CoA,依赖于辅酶NADH.将重组菌在摇瓶中以30 g/l甘油为底物进行微氧发酵培养,经IPTG 诱导,3-羟基丙酸的浓度可达到0.8 g/L.
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