【摘 要】
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手性环氧氯丙烷是一类有重要价值的有机合成中间体,以手性环氧氯丙烷为前体物,可以获得很多高光学纯的药物中间体.论文通过基因工程方法合成了环氧化物水解酶基因,定向克隆环
【机 构】
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浙江工业大学生物与环境工程学院,浙江杭州,310023
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手性环氧氯丙烷是一类有重要价值的有机合成中间体,以手性环氧氯丙烷为前体物,可以获得很多高光学纯的药物中间体.论文通过基因工程方法合成了环氧化物水解酶基因,定向克隆环氧化物水解酶基因到表达载体pET28b上,并将重组表达质粒pET28b-EH 转入大肠杆菌E. coli BL21(DE3),经酶切和菌落PCR 鉴定,成功构建了重组菌E. coli BL21(DE3)/pET28b-EH.重组菌经IPTG 诱导表达后,SDS-PAGE分析结果显示,在47.0 kDa 处出现蛋白表达条带,经活力测定,重组菌的比酶活可达3.4 U/mg(dry cell).
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