【摘 要】
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以大黄鱼鱼卵为研究对象,利用卵黄蛋白粗提液与鱼卵过敏患者血清的Westem-blotting杂交反应,确定大黄鱼鱼卵主要过敏原为分子量约17 kDa的蛋白.通过丙酮抽提、硫酸铵沉淀及系列柱层析(DEAE-Sepharose、Sp-Sepharose和Sephacryl-S-200 HR)等方法从大黄鱼鱼卵中纯化得到17 kDa蛋白组分,并经肽指纹质量图谱鉴定其为β-c.理化性质分析结果显示,β-c
【机 构】
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集美大学生物工程学院,福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室,厦门 361021 U.S.De
【出 处】
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中国食品科学技术学会第十届年会暨第七届中美食品业高层论坛
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以大黄鱼鱼卵为研究对象,利用卵黄蛋白粗提液与鱼卵过敏患者血清的Westem-blotting杂交反应,确定大黄鱼鱼卵主要过敏原为分子量约17 kDa的蛋白.通过丙酮抽提、硫酸铵沉淀及系列柱层析(DEAE-Sepharose、Sp-Sepharose和Sephacryl-S-200 HR)等方法从大黄鱼鱼卵中纯化得到17 kDa蛋白组分,并经肽指纹质量图谱鉴定其为β-c.理化性质分析结果显示,β-c是一种含糖量为4.2%的糖蛋白,耐酸碱且具有良好的热稳定性;体外模拟胃肠液消化实验中,β -c虽然较易被胃蛋白酶降解,但对于胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶具有较强的耐受性,且其消化产物仍具有一定的免疫活性.进一步采用自行制备的兔抗大黄鱼鱼卵β -c多克隆抗体,与鲤鱼鱼卵、蟹黄、鸡蛋等其他动物的卵黄蛋白粗提液进行免疫印迹实验,结果发现仅有鱼类卵黄蛋白粗提液能与抗体发生免疫交叉反应.加工处理实验结果表明,大黄鱼鱼卵经盐渍、蒸煮及高温高压处理后,其主要过敏原β-c仍具有IgE结合活性.研究结果提示,β-c是一种对高温、酸碱及蛋白酶均稳定的鱼卵主要过敏原.
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