【摘 要】
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目的:研究中药单体组方梓葛冻干粉针对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺氧复氧损伤的保护作用.方法:体外培养HUVECs,采用Krebs液建立缺氧-复氧损伤模型.用梓葛冻干粉针干预后,采
【机 构】
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西南大学 药学院/重庆市药效评价工程技术研究中心,重庆 400716
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目的:研究中药单体组方梓葛冻干粉针对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺氧复氧损伤的保护作用.方法:体外培养HUVECs,采用Krebs液建立缺氧-复氧损伤模型.用梓葛冻干粉针干预后,采用MTT比色法测定细胞活力、黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛(MDA)含量、硝酸还原酶法测定一氧化氮(N0)含量、2,4-二硝基苯肼显色法测定细胞外乳酸脱氢酶(LDH)释放量;Western blot法分析细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达.结果:与模型组相比,梓葛冻干粉针12.5 mg·L显著提高细胞活力(P<0.05);梓葛冻干粉针49.0 mg·L(-),24.5 mg·L(-),12.5 mg·L(-)均显著提高缺氧-复氧后细胞SOD活性(P<0.05):梓葛冻干粉针12.5 mg·L(-),24.5 mg·L(-)能显著减少LDH的释放量及降低MDA和NO的含量(P<0.05),并上调细胞Bcl-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01);梓葛冻干粉针49.0 mg·L(-),24.5 mg·L(-),12.5 mg·L(-1)显著降低Bax的表达并上调Bcl-2/Bax (P<0.05,P<0.01),且梓葛冻干粉针24.5 mg·L(-),49.0mg·L(-)显著降低Caspase-3的表达(P<0.01).结论:梓葛冻干粉针可显著拮抗缺氧-复氧对人脐静脉内皮细胞的损伤,其机制与抑制细胞自由基的产生、提高抗氧化能力及调节凋亡相关蛋白表达密切相关.
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