不同剂量辐射对共培养体系的免疫细胞共刺激分子表达的影响

来源 :首届全球华人辐射研究大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lvsby2009
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  近年来,辐射免疫学效应日益受到关注,特别是不同剂量辐射诱导不同的免疫效应及其机制研究仍是放射生物学领域的热点.通常在机体免疫应答过程中,T、B淋巴细胞的激活需要双信号,其中第一活化信号由MHC分子提供, 而CD28/B7分子间的相互作用是T、B淋巴细胞最重要的第二活化信号,如缺少第二活化信号T、B淋巴细胞将不能被活化,从而产生"无反应"现象或死亡.最新的免疫学理论认为,CD40-CD40L反应是CD28/ B7第二信号活化T淋巴细胞产生CTL所必需的"第三方"共刺激,而且CD40-CD40L反应可以放大CD28/B7分子的反应.因此,在辐射免疫学效应的研究中,阐明免疫细胞表面各种共刺激分子的表达变化及它们之间关系具有重要的理论意义.目的:为阐明高、低剂量辐射的免疫效应机制,在体外观察不同剂量辐射对共培养体系中的两种免疫细胞(树突状细胞,DC/T淋巴细胞,TLC)共刺激分子的表达变化.方法:1.采用细胞因子诱导法(mIL-4、及mGM-CSF)分离小鼠髓源DC,用LPS刺激成熟后,采用流式细胞术检测其特异的标志性表面分子(CD11c和CD80),检测其纯度(分别达到88.6%和85.6%)确认诱导分离成功;用流式细胞仪检测T淋巴细胞的纯度(95%以上).2.在体外将DC与TLC共培养24小时后进行照射,在2 Gy和0.075Gy X射线照射后不同时间,用CD28-PE /CD80-FITC和CD40L-PE/CD40-FITC单克隆荧光抗体分别染色,采用流式细胞术检测各种共刺激分子的表达变化.结果:低剂量X射线照射后CD28、CD80、CD40、CD40L均上升趋势,其中CD28表达照射后12h时明显高于对照组(P<0.05),之后逐渐回降至对照水平,其余的三种分子表达均从12h开始直至72 h明显高于对照组(12h、24 h、48 h、72 h时P<0.01);而高剂量X射线照射后CD28、CD80、CD40的表达从照射后6h开始明显低于对照组,一直维持到72 h(6h、12h、24 h、48 h、72 h时P<0.01),特别是CD28和CD40下降幅度非常明显(对照组的2~3倍以上),但CD40L与其他的表面分子不同,高剂量照射后从6h开始直至48h明显高于对照组(6h、12h、24h、48h时P<0.01).结论:高剂量电离辐射抑制机体免疫效应,低剂量辐射诱导免疫兴奋效应可能与免疫细胞表面的共刺激分子表达不同有关,即低剂量辐射增强共刺激分子CD28/CD80和CD40L/CD40的表达而提高免疫反应,高剂量辐射引起CD28、CD80、CD40的表达降低,从而不能诱导免疫应答反应是主要原因.
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