【摘 要】
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目的:本文旨在了解细环病毒2(Torque teno sus virus2,TTSuV2)病毒蛋白对猪血清的免疫学反应,明确TTSuV2 0RFl编码的氨基酸序列上特定片段的免疫原性,为TTSuV2的免疫学检测方
【机 构】
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广东海大畜牧兽医研究院有限公司,广东广州 511400
【出 处】
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第五届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会2014年学术年会、中国畜牧兽医学会生物制药学分会暨中国微生物学会兽医
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目的:本文旨在了解细环病毒2(Torque teno sus virus2,TTSuV2)病毒蛋白对猪血清的免疫学反应,明确TTSuV2 0RFl编码的氨基酸序列上特定片段的免疫原性,为TTSuV2的免疫学检测方法建立提供实验依据.
方法:以本实验室测序的TTSuV2毒株为研究对象,在大肠杆菌表达系统中克隆表达了TTSuV2 0RF1基因上两相互重叠的基因片段,对表达产物进行纯化,分析了两重组蛋白(TTSuV2 0RFla与TTSuV2 0RFlab)对猪血清抗体的免疫学反应.
结果:应用标签抗体进行Westem-Blotting分析的结果显示,重组TTSuV2 0RFla与TTSuV2 0RFlab蛋白成功表达.应用建立的ELISA方法对212份猪血清进行检测的结果表明,含有179个氨基酸的重组TTSuV2 0RFla 与含有416个氨基酸的重组TTSuV2 0RFlab蛋白之间有显著的相关性,二者对猪血清的反应基本一致.采用猪血清进行Westem-Blotting分析的结果显示,血清抗体可特异性识别两重组蛋白.
讨论:TTSuV2 0RFla与TTSuV2 0RFlab相互重叠的179个氨基酸序列上(168-346)含有TTSuV2 0RFI关键的B细胞表位,重组蛋白TTSuV2 0RFla适用于TTSuV2血清抗体免疫学检测.
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