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[目的]研究邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)对离体大鼠睾丸支持细胞vimentin骨架系统的破坏作用并探索对PPARα (peroxisome proliferation-activated receptor α)及下游MAPK、Smad2/3信号途径在DBP导致vimentin骨架系统损伤中的作用机制.[材料和方法]体外原代培养大鼠睾丸支持细胞,用i00 μM DBP处理细胞.用免疫组化和激光共聚焦显微镜观察vimentin骨架系统在支持细胞中的表达和分布情况,用Western blotting检测PPARα、vimentin、磷酸化vimentin、MAPK、Smad等蛋白的表达情况,用real-time PCR检测vimentin mRNA表达情况,用Chip-PCR检测PPAR α和Smad结合元件的活化状态.用PPARα的抑制剂GW6471、Smad2/3的抑制剂SB431542、P38的抑制剂SB203580、Erk的抑制剂PD98059预处理细胞研究PPARα、MAPK、Smad2/3等信号分子抑制后对vimentin的保护作用.[结果]DBP处理睾丸支持细胞后细胞波形蛋白骨架系统呈现显著降解,并由此引发了支持细胞的皱缩,PPARa的抑制剂GW6471可显著逆转DBP对波形蛋白骨架系统的降解.支持细胞PPARa呈激活状态,其表达显著增加,并由胞浆转移至细胞核内,其激活的PPRE转录因子也显著激活.支持细胞可溶性波形蛋白含量增加,其磷酸化水平也显著增加,而PPARa的抑制剂GW6471可逆转可溶性及磷酸化波形蛋白的增加.说明PPARa导致的波形蛋白磷酸化是导致其降解的主要因素.DBP处理后P-P38及P-Erk1/2表达上升,P-jnk1/2表达未明显改变,而PPARa的抑制可逆转磷酸化Smad2/3的上升和P-38的上升,而抑制P-38后波形蛋白的磷酸化基本被抑制.DBP处理后Smad2/3表达变化不明显但磷酸化水平增加,磷酸化Smad2/3可结合在vimentin转录因子上游促进vimentin mRNA的表达.[结论]DBP处理睾丸支持细胞后,波形蛋白发生解聚,其解聚是由其磷酸化导致的,而DBP诱导的PPARa的活化对波形蛋白的磷酸化起至关重要的作用,由PPARa活化到波形蛋白磷酸化的过程中P-38的磷酸化是其中的关键步骤.DBP诱导的PPARα活化还可以激活Smad2/3,使支持细胞vimentin mRNA表达增加.