RNA干扰下调翻译控制肿瘤蛋白对人皮肤鳞癌细胞增殖和凋亡的影响

来源 :第二届全国皮肤病与性病学博士生学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Anody12341234
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  目的 检测翻译控制肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)在人皮肤鳞状细胞癌(Human cutaneous squamous cell carcinoma,SCC)组织及其细胞株A431及SCL-1 中的表达,继而在A431 细胞株中干扰TCTP 的表达,观察其对鳞癌细胞凋亡及增殖的影响.方法 免疫组化法观察TCTP 蛋白在鳞癌组织中的表达情况,Western-Blot 法检测TCTP 蛋白在SCC 细胞株A431 及SCL-1 中的表达情况.继而构建针对编码TCTP 的基因TPT1(tumor protein translationally-controlled 1)的siRNA 序列,通过脂质体转染法转入A431细胞中,RT-PCR 法检测TPT1 的表达,Western-Blot 法检测TCTP 蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率,MTT 法检测A431 细胞增殖情况.结果 免疫组化结果显示在SCC 中存在着TCTP 的高表达,且其表达水平与癌组织的分级有着正相关关系(P<0.05).Western-Blot结果证实与人角质形成细胞株(Hacat)相比在A431 细胞及SCL-1 细胞株中都存在着TCTP的高表达,以A431 细胞表达为甚.RT-PCR 及Western-Blot 结果显示合成的siRNA 可以有效下调A431 细胞中PT1 及TCTP 的表达,凋亡检测及MTT 检测显示这种下调可引起A431细胞凋亡率的上升和细胞增殖的抑制.结论 TCTP 蛋白在SCC 的发生发展过程中起着促进作用,可能成为一个新的肿瘤分子治疗靶点.
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