梅毒螺旋体重组蛋白Tp0136的表达、纯化及免疫活性的分析

来源 :第二届全国皮肤病与性病学博士生学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:stystill
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  目的 克隆并表达梅毒螺旋体Tp0136 基因,并对其表达产物进行纯化以及免疫活性分析.方法 全基因合成Tp0136 基因,构建E.coli 表达载体;诱导表达并纯化重组蛋白,用SDS-PAGE 和Western blot 鉴定;用纯化的重组蛋白Tp0136 免疫新西兰兔,并以重组Tp0136 作为包被抗原建立间接ELISA 以鉴定其免疫原性;Western blot 检测梅毒阳性血清鉴定其免疫反应性.结果 成功构建E.coli 表达载体pET28-Tp0136;成功表达和纯化出膜蛋白Tp0136,相对分子量约为50kd,纯度>95%.用重组蛋白Tp0136 免疫新西兰兔,能刺激其产生高滴度抗体,具有较强的免疫原性.Western 印迹显示其能与梅毒阳性血清发生特异性反应,具有较好的免疫反应性.结论 成功地表达出具有完整基因和较强免疫活性的膜蛋白Tp0136,为进一步研究膜蛋白的功能奠定基础.
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