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目的
探究二肽基肽酶4(DPP4)在人血管平滑肌细胞(HVSMC)钙化过程中的作用机制。
方法用200 ng/ml DPP4诱导人血管平滑肌细胞(HVSMCs)成骨分化,建立细胞钙化模型,以基因芯片筛查DPP4组和对照组差异表达的长链非编码RNA,采用实时定量PCR(RT-qPCR)验证基因间长链非编码RNA(LincRNA)ENST00000540293的基因芯片分析结果。以LincRNA ENST00000540293沉默阳性试剂孵育HVSMCs 48 h,用Western印迹法检测钙化相关蛋白骨保护素(OPG)和骨形态发生蛋白2(BMP-2)的表达,以茜素红染色观察矿化结节的形成。
结果DPP4干预后HVSMCs中OPG、BMP-2的蛋白表达显著升高(P<0.05),矿化结节明显增加。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,DPP4诱导的钙化组中LincRNA ENST00000540293明显降低(P<0.05)。干扰LincRNA ENST00000540293表达后钙化相关蛋白OPG和BMP-2的表达明显增加(P<0.05)。
结论DPP4促进HVSMCs的钙化过程可能与抑制LincRNA ENST00000540293的表达相关。