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目的 运用氨等离子体辅助接枝技术,在消旋聚乳酸(poly-D,L-lactide acid,PDLLA)表面以酰胺键接枝甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(Gly-Arg-Gly-Asp-Ser,GRGDS)短肽,探讨制备活性骨替代材料的可行性.方法 使用溶剂浇铸/颗粒沥析法制备圆片状直径8 mm、厚1 mm的PDLLA三维骨支架,行氨等离子体改性处理制备表面氨基化PDLLA(aminated PDLLA,A/PDLLA),测量未改性(0min对照组)及改性5、10、20min组支架的孔径、孔隙率和表面水接触角.以上各组A/PDLLA放入1 mg/mLFITC标记的GRGDS肽溶液[1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺、活性肽的摩尔比值为1.5:1.5:1.0],室温下低速震荡24 h行表面接枝处理,得到接枝肽处理材料(peptides coniugatedA/PDLLA,PA/PDLLA).对未改性(0 min对照组)、改性5、10、20 min及其后接枝肽处理的材料行X射线光电子能谱(X-ray photoelectron spectroscopy,XPS)仪检测;对PDLLA和改性0、5、10、20 min后接枝肽处理的材料行激光共聚焦显微镜观察及高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)定量分析.全骨髓贴壁法分离、培养SD大鼠BMSCs,取第3～6代细胞接种于以下3组材料:20 min氨等离子体改性组(A/PDLLA组)、20 min氨等离子体改性后接枝肽组(PA/PDLLA组)及未经处理的PDLLA对照组(PDLLA组).各组BMSCs-材料复合物培养16 h后测定细胞上架数及上架率;培养4、8 d行扫描电镜观察.结果 PDLLA孔径和孔隙率不随氨等离子体改性时间变化而变化(P>0.05).随着氨等离了体改性时间延长,A/PDLLA支架表面水接触角逐渐减小,材料亲水性能逐步改善,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.001).XPS检测示,A/PDLLA支架表面出现N元素,且随改性时间延长,N1s峰渐趋明显,N/C逐渐加大;PA/PDLLA支架N/C相应加大,表面出现S2p峰.激光共聚焦显微镜观察示PA/PDLLA支架荧光强度随改性时间延长而明显增强.HPLC成功测得经10 min和20 min氨等离子体改性后接枝肽处理的PA/PDLLA接枝肽量,两者比较差异有统计学意义(P<0.001);而PDLLA及经0、5 min氨等离子体改性后接枝肽处理的PA/PDLLA接枝肽量未检出.与BMSCs复合培养16 h,A/PDLLA组和PA/PDLLA组细胞上架数和上架率均高于PDLLA组,3组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.01).扫描电镜观察示,A/PDLLA组和PA/PDLLA组比PDLLA组更能促进BMSCs贴附增殖,尤以PA/PDLLA组最明显.结论 氨等离子体改性能明显促进PDLLA表面以酰胺键接枝FITC-GRGDS短肽:此仿生人工骨材料生物活性稳定,能明显促进BMSCs贴附和增殖.