【摘 要】
：
目的:探讨细胞分裂周期蛋白37 (Cdc37)在多发性骨髓瘤(MM)中的表达及其对MM细胞增殖的影响.方法:采用实时定量PCR技术检测63例初治MM患者及8例正常人CD138+细胞中Cdc37 mRNA表达水平.采用慢病毒感染技术,下调MM细胞系NCI-H929细胞中Cdc37的表达水平,CCK-8法、软琼脂克隆形成实验检测Cdc37对MM细胞体外增殖能力的影响.建立NOD/SCID小鼠皮下成瘤模型,验证Cdc37对MM细胞体内增殖能力的影响.流式细胞术检测Cdc37对MM细胞周期的影响,蛋白免疫印迹法检
【机 构】
：
河北医科大学第三医院血液科,河北石家庄050000;中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所),实验血液学国家重点实验室,国家血液病临床医学研究中心,天津300020
论文部分内容阅读
目的:探讨细胞分裂周期蛋白37 (Cdc37)在多发性骨髓瘤(MM)中的表达及其对MM细胞增殖的影响.方法:采用实时定量PCR技术检测63例初治MM患者及8例正常人CD138+细胞中Cdc37 mRNA表达水平.采用慢病毒感染技术,下调MM细胞系NCI-H929细胞中Cdc37的表达水平,CCK-8法、软琼脂克隆形成实验检测Cdc37对MM细胞体外增殖能力的影响.建立NOD/SCID小鼠皮下成瘤模型,验证Cdc37对MM细胞体内增殖能力的影响.流式细胞术检测Cdc37对MM细胞周期的影响,蛋白免疫印迹法检测周期相关蛋白的表达变化和NF-κB信号通路的改变.结果:与正常人相比,Cdc37在初治MM患者CD138+细胞中显著高表达.采用shRNA慢病毒感染技术下调NCI-H929细胞中Cdc37的表达水平,抑制了MM细胞在体内及体外的增殖能力.与对照组相比,NCI-H929-Cdc37 shRNA细胞中G0/G1期细胞比例显著增加,细胞周期素cyclinD1的表达水平明显下调,而周期负向调控因子p21及其上游调控分子p53的表达明显上调.同时,NCI-H929-Cdc37 shRNA细胞中NF-κB信号通路激活受抑.结论:Cdc37在初治MM患者中高表达,下调Cdc37可抑制MM细胞NCI-H929的增殖活性,诱导细胞周期阻滞于G0/G1期.其机制可能是抑制NF-κB信号通路的激活.
其他文献
目的:通过在细胞系Granta-519和JVM-2敲低/过表达TRIP13来探索TRIP13对B细胞淋巴瘤细胞增殖与凋亡的调控作用及可能的分子机制.方法:使用慢病毒转染技术构建敲低/过表达TRIP13的Granta-519细胞和JVM-2细胞及其对照组细胞,荧光显微镜判断慢病毒对细胞的转染效率,实时荧光定量PCR技术和蛋白免疫印迹法评估敲低/过表达效率,CCK-8法检测细胞增殖能力,Annexin V-APC单染法检测细胞凋亡率,PI染色法检测细胞周期,蛋白免疫印迹法检测P53、MDM4和BCL-2的表达
目的:探讨二硫化二砷联合伊曲康唑对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的作用以及Hedgehog信号通路的影响.方法:将不同浓度的二硫化二砷和伊曲康唑与弥漫大B细胞淋巴瘤细胞株OCI-LY3共培养.采用CCK-8方法检测细胞增殖情况;AnnexinV-PI方法检测细胞凋亡率;Western blot检测BCL-2、BAX、SM0、Glil蛋白的表达水平.结果:伊曲康唑与弥漫大B细胞淋巴瘤细胞株OCI-LY3共培养24、48和72 h后,细胞活力随作用时间的延长明显下降.随着伊曲康唑浓度的增加,OCI-LY3细
目的:探讨糖酵解酶丙酮酸激酶M2型(PKM2)对人白血病细胞HL-60增殖和凋亡的影响及其分子机制.方法:以干扰PKM2的质粒转染HL-60细胞株(si-PKM2组),同时将转染空载体的HL-60细胞设为对照组(si-Ctl组).采用RT-qPCR和Western blot技术分别检测si-Ctl组和si-PKM2组PKM2 mRNA和蛋白水平的变化;CCK-8检测两组细胞的增殖能力;采用流式细胞术检测两组细胞周期和凋亡的变化;Western blot和RT-qPCR技术检测两组细胞中PI3K/Akt/m
目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者诱导化疗的治疗效果与预后的关系.方法:收集并回顾性分析2015年3月至2018年3月本院收治的146例AML成年患者的临床资料,主要观察指标为诱导治疗d 14骨髓(D14BM)增生程度及原始细胞的比例,外周血白血病细胞(PBB)清除时间及日减少率等.根据随访2年患者的存活和复发情况分为无复发存活组、复发存活组、无复发死亡组、复发死亡组.采用Kaplan-Meier法行生存分析,有序Logistic回归分析对预后相关因素行单因素分析,绘制ROC曲线并评估上述指标对患者2
目的:探讨伴NUP98基因重排的成人急性髓系白血病(AML)患者的临床特点、治疗效果及预后因素.方法:回顾性分析2015年1月至2019年12月解放军总医院第一医学中心血液科收治的伴有NUP98基因重排的成人AML患者的临床表现、实验室检查、遗传学异常、治疗方案及生存情况等临床资料.结果:410例成人AML患者中,共检测出15例伴有NUP98基因重排的患者,检出率为3.7％.15例患者的男女比例为1.1∶1,中位年龄43(17-76)岁,FAB分型主要为M2型和M4/M5型,遗传学预后分层11例为中危组,
目的:探讨滤泡辅助性T细胞(Tfh)/滤泡调节性T细胞(Tfr)失衡在B细胞淋巴瘤(BCL)中的作用.方法:收集宜昌市第一人民医院血液科2019年12月至2020年11月确诊的16例BCL患者作为观察组,20例健康人作为对照纽,采用流式细胞术检测外周血Tfh、Tfr细胞水平,比较两组Tfh、Tfr细胞水平及Tfh/Tfr比值的变化情况,同时比较化疗及多种临床因素下患者Tfh、Tfr细胞水平及Tfh/Tfr比值的变化情况,分析Tfh/Tfr比值与疗效及预后的关系.结果:与健康对照组比较,BCL患者外周血Tf
目的:筛选并鉴定儿童急性早幼粒细胞白血病(APL)血清差异表达蛋白,寻找潜在的APL生物标记物.方法:选取APL与健康儿童血清各20例,采用同位素标记的相对和绝对定量(iTRAQ)联合二维液相色谱串联质谱(2DLC-MS/MS)技术筛查差异蛋白,并进行生物信息学分析;对差异蛋白S100A8、LRG1及SPARC应用ELISA进一步验证;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析法,评价差异蛋白对儿童APL的诊断效能.结果:APL患儿血清中检测出83种差异表达蛋白,其中33种蛋白表达上调,50种蛋白表达下调;生物
目的:通过检测炎性复合体NLRP3在儿童免疫性血小板减少症(ITP)治疗前后的变化,明确其在ITP治疗中的意义.方法:纳入20例于徐州市儿童医院确诊并治疗的ITP患儿为观察组,以10例健康体检儿童为对照纽.通过实时荧光定量PCR测定NLRP3、ASC和Caspase-1的mRNA表达量,ELISA法检测外周血血清中白细胞介素-18、白细胞介素-1β和高迁移率蛋白B1的表达,Western blot方法检测NLRP3的表达.结果:初诊ITP患儿治疗后血清白细胞介素-18、白细胞介素-1β和高迁移率蛋白B1水
目的:探讨T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)患儿经CCLG-ALL2008方案化疗后微量残留疾病(MRD)监测预测生存预后的最佳时机.方法:回顾性总结2015年1月至2020年1月于无锡市儿童医院确诊T-ALL后接受CCLG-ALL2008方案化疗的患儿共96例,中位随访时间43.5(9-65)个月.用Kaplan-Meier生存曲线绘制总体无事件生存率(EFS)和总生存率(0S),单因素比较EFS组与复发组、OS组与死亡组的临床资料、化疗d 15、33和90 d的MRD水平,多因素Logistic回
背景随着我国老年人口寿命延长，老年人带病期相应变长。河南省老年人口数量不容小觑，慢性病问题成为老年人健康生活的一项重大挑战。目的调查河南省老年人综合能力现状及慢性病患病情况，并分析老年人综合能力与慢性病的关系。方法2019年1—9月，采用多阶段分层整群随机抽样方法抽取河南省18个省辖市60岁及以上常住老年人进行现场访谈式问卷调查。调查表包括一般资料调查表（其中慢性病包括高血压、糖尿病、冠心病、慢性