【摘 要】
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为探究不同复性方法制备的重组大肠杆菌外膜蛋白A(rOmpA)的免疫原性,研究分别用纯化的β-环糊精复性rOmpA(β-rOmpA)、吐温-20复性rOmpA(T-rOmpA)和包涵体形式rOmpA(I-rOmpA)
【机 构】
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黑龙江八一农垦大学,大庆 163319;和元生物工程股份有限公司
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为探究不同复性方法制备的重组大肠杆菌外膜蛋白A(rOmpA)的免疫原性,研究分别用纯化的β-环糊精复性rOmpA(β-rOmpA)、吐温-20复性rOmpA(T-rOmpA)和包涵体形式rOmpA(I-rOmpA)作为抗原,与弗氏佐剂乳化后肌肉注射免疫接种小鼠.通过检测血清特异性抗体、脾淋巴细胞分泌细胞因子及攻毒试验进行免疫效力评价.结果,β-rOmpA免疫组小鼠血清抗体水平高于T-rOmpA免疫组和I-rOmpA免疫组(P<0.05);三种抗原免疫均能提高小鼠淋巴细胞分泌IFN-γ水平,且在体外由rOmpA刺激下,β-rOmpA免疫组小鼠产生的IFN-γ、IL-17A水平显著高于T-rOmpA和I-rOmpA免疫组(P<0.05);用E.coli 2002-1菌株腹腔攻毒后,β-rOmpA免疫组小鼠肝、脾、肺、肾中的细菌定植量显著低于T-rOmpA免疫组和I-rOmpA免疫组(P<0.001);攻毒后第2 d PBS对照组小鼠免疫保护率为0时,β-rOmpA免疫组为60％,T-rOmpA免疫组为40％,I-rOmpA免疫组为30％.结果表明,β-环糊精复性纯化的rOmpA免疫原性最好,诱导机体产生免疫应答和免疫保护作用最强.
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