论文部分内容阅读
摘要：笔者针对目前制剂中冰片与薄荷脑成分常用检测方法存在的问题，通过大量的实验，摸索出用薄层色谱法同板检测冰片与薄荷脑的方法，并对展开剂系统进行了筛选，摸索出具有设备、操作简单，检测费用低；方法专一性和准确性强；检测周期短；易于推广应用等特点的检测方法。
关键词：冰片、薄荷脑、薄层色谱、展开剂
中图分类号：TJ765.4
冰片与薄荷脑是常用的中药，它们具有挥发性，容易在药品的制备、储运等过程中散失而使药效降低，为了保证药品质量与疗效，制订针对制剂组方中易挥发物质的行之有效的检测标准是控制药品质量的有效方法。但是制剂组方中如同时具有冰片与薄荷脑，就难以避免对这两种具挥发性的药物同时进行质量控制，而由于冰片与薄荷脑的极性相仿，很难进行有效的分离，现行方法多数采用气相色谱法对其进行定性检测。然而气相色谱仪昂贵的价格与其对供试品苛刻的要求，使得应用此法相对繁琐、耗时，况且当今含量检测等常规检测向液相色谱方法靠拢，生产及检测机构的检测工作量大大增加，如待测样品量大，庞大的实验量不仅对气相色谱仪有损害，更由于气相色谱仪相对繁琐的在线操作的特性致使检测周期加长，不利于质量在线控制或延误销售的最佳商机。
薄层色谱技术由于设备简单，操作简易，技术普及性高，且由于其独具的离线操作（对不同批次的待测样品可同时分别进行检测）的灵活特性而成为首选。然而对冰片与薄荷脑两者同时检测的薄层方法少见报道，且多数方法可行性有待斟酌，这给有此类需求的应用者带来了诸多不便，有感于此，笔者进行了薄层色谱同板检测冰片与薄荷脑的展开剂摸索实验，并获得了成功。
冰片薄层色谱检测的展开剂以用甲苯-丙酮（96：4）居多1，而测定中药制剂中薄荷挥发油类成分的方法主要是气相色谱法1，偶有以苯-乙酸乙脂（95：1）为展开剂1等方法。对此两种展开剂进行极性参数计算（参数参考文献2）比较可得：甲苯-丙酮（96：4）P′=2.4×0.96+5.1×0.4=4.3；苯-乙酸乙脂（95：1）P′=2.7×0.95+4.4×0.1=3.0。我们知道如溶剂P′变化两个单位，能引起k值十倍变化，两者极性参数相差如此之大，如何找到一种使两种物质分离良好的极性参数是解决此难题的首要问题。通过资料检索，于网上发现一种同板检测冰片和薄荷脑的展开剂系统：正几烷-苯-丙酮（14：6：1）。计算极性参数P′=0.1×0.6667+2.7×0.2857+5.1×0.0476=1.1不难发现极性参数较分检展开剂小很多。根据增加溶剂强度使Rf值增大，但很可能降低分离能力，反之亦然3的道理推测，正几烷-苯-丙酮（14：6：1）是可行的。但可惜的是此展开剂系统存在两大缺点：1、此展开剂系统含苯，苯有巨毒，不但污染环境，还对检测者的健康威胁很大；2、苯按Sander溶剂选择性分类表属Ⅶ组，丙酮属Ⅵ组，两组在溶剂选择性三角形中相衔接2，两种溶剂的组合达不到选择性差别最大的要求，这是此展开剂系统的先天不足，对如此难以分离的物质对进行分离的效果也将差强人意，这一点在后期的实验中也得到了验证。
采用，圆底烧瓶中放入适量样品，加水，联接挥发油提取器，向挥发油提取器中加水10ml，再加乙酸乙脂3 ml，加热使沸腾，保持回流4小时，放冷，分取乙酸乙脂，用适量乙酸乙脂洗涤挥发油提取器，合并乙酸乙脂于适当刻度容量瓶中，以乙酸乙脂稀释至刻度，摇匀作为供试液。在正几烷-苯-丙酮（14：6：1）展开剂系统的基础上，考虑用乙醚替代苯，因苯极性参数是2.7，乙醚极性参数是2.8，两者相差无几，且乙醚属Ⅰ组，与丙酮的Ⅵ组相差很远，符合选择性差别最大的要求。即采用正几烷-乙醚-丙酮（14：6：1）展开剂系统进行分离。经实验发现薄荷脑与龙脑的分离欠佳。变换溶剂比例使溶剂强度减小，经多次实验发现两者的Rf值减小，薄荷脑与异龙脑的分离度增加，已基本分离。但考虑到随着操作者和操作条件的变换，重现性可能存在差异，故决定继续研究以便找到最佳展开剂系统。
经资料检索，发现冰片展开剂石油醚-乙酸乙脂-三氯甲烷（22：2：6）。经实验发现薄荷脑与异龙脑分离欠佳，分析认为三氯甲烷可使薄荷脑靠近异龙脑，而乙醚可使薄荷脑靠近龙脑，且石油醚属己烷溶剂，乙酸乙脂与丙酮同属Ⅵ组，乙醚属Ⅰ组，三氯甲烷属Ⅷ组，如用正己烷、乙醚、三氯甲烷组成展开剂，有可能将薄荷脑、龙脑、异龙脑得到良好的分离。故采用正己烷-乙醚-三氯甲烷（17：6：2）为展开剂实验，（其极性参数P′=0.1×0.68+2.8×0.24+4.1×0.08=1.1）发现薄荷脑、龙脑、异龙脑得到了良好的分离。经多次调整溶剂比例，最终锁定正己烷-乙醚-三氯甲烷（20：10：1）作为展开剂时，分离良好，重现性良好。其极性参数P′=0.1×0.6452+2.8×0.3226+4.1×0.0323=1.1。在此展开剂系统下薄荷脑Rf值为0.48；龙脑Rf值为0.42；异龙脑Rf值为0.53，薄荷脑的k值为1.08；龙脑k值为1.38；异龙脑k值为0.89，符合k值的最佳范围0.4～4的原则。至此可以看到此展开剂系统与正几烷-苯-丙酮（14：6：1）的极性参数是相同的。说明正几烷-苯-丙酮（14：6：1）展开剂系统的极性参数是可行的，只是存在上文提到的缺点。从另一角度来看，正几烷-苯-丙酮（14：6：1）展开剂系统中薄荷脑的k值为0.64；龙脑k值为0.82；异龙脑k值为0.49，k值已接近最佳范围0.4～4的底线。
分析认为从模糊聚类分析溶剂选择性分类表3中得知乙醚属质子接受体溶剂、三氯甲烷属大偶极距溶剂，而薄荷脑又名薄荷醇，其醇羟基的质子给予作用相对三氯甲烷与乙醚这种质子接受体溶剂结合更紧密，形成的氢键较三氯甲烷的大偶极距作用更强，换句话说，乙醚可使薄荷脑的K值相对龙脑和异龙脑变大，而三氯甲烷更倾向于使其K值相对龙脑和异龙脑变小。而无论乙醚还是三氯甲烷对龙脑和异龙脑的K值调整不及薄荷脑那么敏感，这也是其结构特点使然。而正几烷-苯-丙酮（14：6：1）展开剂系统中苯不论现有的Sander溶剂选择性分类表3还是模糊聚类分析溶剂选择性分类表3中都未与说明其选择性，暂且认为苯与己烷等惰性溶剂相似，选择性很低，而按模糊聚類分析溶剂选择性分类表3丙酮属电子给予体，也就是说整个系统的选择性与丙酮的选择性一致，即此展开剂的选择性分类为电子给予体选择性的展开剂。
参考文献：1、伍朝筼等，《中成药研究》1987，12
2、张亮等，《中国医科大学学报》1997.01
3、朱晓琳等，《西部中医药》2012，09
4、《中华人民共和药典》2010年版
关键词：冰片、薄荷脑、薄层色谱、展开剂
中图分类号：TJ765.4
冰片与薄荷脑是常用的中药，它们具有挥发性，容易在药品的制备、储运等过程中散失而使药效降低，为了保证药品质量与疗效，制订针对制剂组方中易挥发物质的行之有效的检测标准是控制药品质量的有效方法。但是制剂组方中如同时具有冰片与薄荷脑，就难以避免对这两种具挥发性的药物同时进行质量控制，而由于冰片与薄荷脑的极性相仿，很难进行有效的分离，现行方法多数采用气相色谱法对其进行定性检测。然而气相色谱仪昂贵的价格与其对供试品苛刻的要求，使得应用此法相对繁琐、耗时，况且当今含量检测等常规检测向液相色谱方法靠拢，生产及检测机构的检测工作量大大增加，如待测样品量大，庞大的实验量不仅对气相色谱仪有损害，更由于气相色谱仪相对繁琐的在线操作的特性致使检测周期加长，不利于质量在线控制或延误销售的最佳商机。
薄层色谱技术由于设备简单，操作简易，技术普及性高，且由于其独具的离线操作（对不同批次的待测样品可同时分别进行检测）的灵活特性而成为首选。然而对冰片与薄荷脑两者同时检测的薄层方法少见报道，且多数方法可行性有待斟酌，这给有此类需求的应用者带来了诸多不便，有感于此，笔者进行了薄层色谱同板检测冰片与薄荷脑的展开剂摸索实验，并获得了成功。
冰片薄层色谱检测的展开剂以用甲苯-丙酮（96：4）居多1，而测定中药制剂中薄荷挥发油类成分的方法主要是气相色谱法1，偶有以苯-乙酸乙脂（95：1）为展开剂1等方法。对此两种展开剂进行极性参数计算（参数参考文献2）比较可得：甲苯-丙酮（96：4）P′=2.4×0.96+5.1×0.4=4.3；苯-乙酸乙脂（95：1）P′=2.7×0.95+4.4×0.1=3.0。我们知道如溶剂P′变化两个单位，能引起k值十倍变化，两者极性参数相差如此之大，如何找到一种使两种物质分离良好的极性参数是解决此难题的首要问题。通过资料检索，于网上发现一种同板检测冰片和薄荷脑的展开剂系统：正几烷-苯-丙酮（14：6：1）。计算极性参数P′=0.1×0.6667+2.7×0.2857+5.1×0.0476=1.1不难发现极性参数较分检展开剂小很多。根据增加溶剂强度使Rf值增大，但很可能降低分离能力，反之亦然3的道理推测，正几烷-苯-丙酮（14：6：1）是可行的。但可惜的是此展开剂系统存在两大缺点：1、此展开剂系统含苯，苯有巨毒，不但污染环境，还对检测者的健康威胁很大；2、苯按Sander溶剂选择性分类表属Ⅶ组，丙酮属Ⅵ组，两组在溶剂选择性三角形中相衔接2，两种溶剂的组合达不到选择性差别最大的要求，这是此展开剂系统的先天不足，对如此难以分离的物质对进行分离的效果也将差强人意，这一点在后期的实验中也得到了验证。
采用，圆底烧瓶中放入适量样品，加水，联接挥发油提取器，向挥发油提取器中加水10ml，再加乙酸乙脂3 ml，加热使沸腾，保持回流4小时，放冷，分取乙酸乙脂，用适量乙酸乙脂洗涤挥发油提取器，合并乙酸乙脂于适当刻度容量瓶中，以乙酸乙脂稀释至刻度，摇匀作为供试液。在正几烷-苯-丙酮（14：6：1）展开剂系统的基础上，考虑用乙醚替代苯，因苯极性参数是2.7，乙醚极性参数是2.8，两者相差无几，且乙醚属Ⅰ组，与丙酮的Ⅵ组相差很远，符合选择性差别最大的要求。即采用正几烷-乙醚-丙酮（14：6：1）展开剂系统进行分离。经实验发现薄荷脑与龙脑的分离欠佳。变换溶剂比例使溶剂强度减小，经多次实验发现两者的Rf值减小，薄荷脑与异龙脑的分离度增加，已基本分离。但考虑到随着操作者和操作条件的变换，重现性可能存在差异，故决定继续研究以便找到最佳展开剂系统。
经资料检索，发现冰片展开剂石油醚-乙酸乙脂-三氯甲烷（22：2：6）。经实验发现薄荷脑与异龙脑分离欠佳，分析认为三氯甲烷可使薄荷脑靠近异龙脑，而乙醚可使薄荷脑靠近龙脑，且石油醚属己烷溶剂，乙酸乙脂与丙酮同属Ⅵ组，乙醚属Ⅰ组，三氯甲烷属Ⅷ组，如用正己烷、乙醚、三氯甲烷组成展开剂，有可能将薄荷脑、龙脑、异龙脑得到良好的分离。故采用正己烷-乙醚-三氯甲烷（17：6：2）为展开剂实验，（其极性参数P′=0.1×0.68+2.8×0.24+4.1×0.08=1.1）发现薄荷脑、龙脑、异龙脑得到了良好的分离。经多次调整溶剂比例，最终锁定正己烷-乙醚-三氯甲烷（20：10：1）作为展开剂时，分离良好，重现性良好。其极性参数P′=0.1×0.6452+2.8×0.3226+4.1×0.0323=1.1。在此展开剂系统下薄荷脑Rf值为0.48；龙脑Rf值为0.42；异龙脑Rf值为0.53，薄荷脑的k值为1.08；龙脑k值为1.38；异龙脑k值为0.89，符合k值的最佳范围0.4～4的原则。至此可以看到此展开剂系统与正几烷-苯-丙酮（14：6：1）的极性参数是相同的。说明正几烷-苯-丙酮（14：6：1）展开剂系统的极性参数是可行的，只是存在上文提到的缺点。从另一角度来看，正几烷-苯-丙酮（14：6：1）展开剂系统中薄荷脑的k值为0.64；龙脑k值为0.82；异龙脑k值为0.49，k值已接近最佳范围0.4～4的底线。
分析认为从模糊聚类分析溶剂选择性分类表3中得知乙醚属质子接受体溶剂、三氯甲烷属大偶极距溶剂，而薄荷脑又名薄荷醇，其醇羟基的质子给予作用相对三氯甲烷与乙醚这种质子接受体溶剂结合更紧密，形成的氢键较三氯甲烷的大偶极距作用更强，换句话说，乙醚可使薄荷脑的K值相对龙脑和异龙脑变大，而三氯甲烷更倾向于使其K值相对龙脑和异龙脑变小。而无论乙醚还是三氯甲烷对龙脑和异龙脑的K值调整不及薄荷脑那么敏感，这也是其结构特点使然。而正几烷-苯-丙酮（14：6：1）展开剂系统中苯不论现有的Sander溶剂选择性分类表3还是模糊聚类分析溶剂选择性分类表3中都未与说明其选择性，暂且认为苯与己烷等惰性溶剂相似，选择性很低，而按模糊聚類分析溶剂选择性分类表3丙酮属电子给予体，也就是说整个系统的选择性与丙酮的选择性一致，即此展开剂的选择性分类为电子给予体选择性的展开剂。
参考文献：1、伍朝筼等，《中成药研究》1987，12
2、张亮等，《中国医科大学学报》1997.01
3、朱晓琳等，《西部中医药》2012，09
4、《中华人民共和药典》2010年版