高分化及低分化鼻咽癌细胞株中Epstein-Barr病毒潜伏感染膜蛋白(LMP1)基因的原位杂交与克隆及序列分析

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应用染色体原位杂交、PCR扩增、克隆及核苷酸序列分析等方法,分析了CNE1和CNE3细胞株中的潜伏感染膜蛋白(LMP1)基因。CNE1是来自我国东北的高分化鼻咽癌细胞株,CNE3是来自广西的低分化鼻咽癌细胞株。染色体原位杂交结果表明,CNE1细胞中LMP1基因存在于细胞核内,整合在第一号染色体上,CNE3中LMP1基因则随机存在于细胞核内及多条染色体上。用PCR方法分别从CNE1及CNE3中扩增得到了LMP1基因片段(外显子3),核苷酸序列分析证明,来自CNE1的LMP1与来自B95-8细胞的LMP1核苷酸序列同源性极高,达99.5%,而CNE3的LMP1基因与B95-8的LMP1基因同源性为93%。 The latent membrane protein (LMP1) gene in CNE1 and CNE3 cell lines was analyzed by chromosomal in situ hybridization, PCR amplification, cloning and nucleotide sequence analysis. CNE1 is a well-differentiated nasopharyngeal carcinoma cell line from northeast China, and CNE3 is a poorly-differentiated nasopharyngeal carcinoma cell line from Guangxi. Chromosome in situ hybridization results showed that, LMP1 gene in CNE1 cells exist in the nucleus, integrated in the first chromosome, CNE3 LMP1 gene is randomly present in the nucleus and multiple chromosomes. The LMP1 gene fragment (exon 3) was amplified by PCR from CNE1 and CNE3, respectively. Nucleotide sequence analysis showed that LMP1 from CNE1 was homologous to the LMP1 nucleotide sequence from B95-8 cell High, up to 99.5%, whereas the homology of the LMP1 gene of CNE3 to that of B95-8 was 93%.
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