人钠／二羧酸协同转运蛋白1基因融合表达及其抗体制备

• 作 者: 何娅妮 陈香美 于志恒 吕杨 师锁柱 朱晗玉 彭丽霞
• 机 构: 中国人民解放军总医院肾科
• 出 处: 中国生物化学与分子生物学报
• 发表日期: 2002年3期
• 关键词: 人钠/二羧酸协同转运蛋白 1基因融合表达 抗体 制备 human Na+/dicarboxylate cotransporter 1 fusion expre
• 基金项目: 国家自然科学基金，国家重点基础研究发展计划(973计划)

利用DNA重组技术,将编码人钠/羧酸协同转运蛋白1(hNaDC1)抗原表位区(W138-Q219)的cDNA克隆至融合表达载体pGEX-5X-1,构建重组质粒pGEX-hNaDCL6.在大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导,获得谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-hNaDC1重组融合蛋白的表达.以谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和层析,获得纯化的GST-hNaDC1.以此为免疫原制备的抗hNaDC1抗体可特异性识别人类和大鼠肾组织以及小肠组织中天然的钠/二羧酸协同转运蛋白1.利用该抗体,首次证实了hNaDC1