【摘 要】
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为建立可靠并且稳定的SRAP-PCR反应体系,进一步开展新疆薰衣草种质资源的遗传多样性研究提供帮助.本研究采用L16(45)正交试验设计方法,对薰衣草SRAP-PCR反应体系主要影响因素
【机 构】
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新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830052
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为建立可靠并且稳定的SRAP-PCR反应体系,进一步开展新疆薰衣草种质资源的遗传多样性研究提供帮助.本研究采用L16(45)正交试验设计方法,对薰衣草SRAP-PCR反应体系主要影响因素DNA模板、Mg2+、dNTPs、引物浓度及Taq DNA聚合酶的用量进行了筛选,比较了5个因素对扩增效果的影响.试验结果表明,各因素水平变化对反应体系的影响从大到小依次为:Mg2+＞引物＞Tap聚合酶＞dNTPs＞DNA;建立的最佳反应体系为:总体积25.0 μL,2.5 μL 10×Buffer、Mg2+浓度3.0 mmol/L、d NTPs浓度0.32 mmol/L、引物浓度0.24 μmol/L、DNA模板量60 ng、 TaqDNA聚合酶用量0.4 U,该体系经验证可以扩增出清晰、稳定且多态性较好的条带,可为开展后续的研究提供技术基础.
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